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基因克隆简介一.DNA分子克隆的基本原理 v 基因克隆（genecloning）或分子克隆,又称为重组 技术，是应用酶学方法，在体外将不同来源 的DNA分子通过酶切、连接等操作重新组装成杂合 分子，并使之在适当的宿主细胞中进行扩增，形成 大量的子代DNA分子的过程。 v 克隆（clone）一指含有单一的DNA重组体的无性 繁殖系，或指将DNA重组体引入宿主细胞建立无性 繁殖系的过程(cloning)。一个完整的基因克隆过程包括以下步骤 v .获得待克隆的DNA片段（基因）； .目的基因与载体在体外连接； .重组DNA分子导入宿主细胞； .筛选、鉴定阳性重组子； .重组子的扩增与或表达。 1.从生物有机体基因组中，分离出带有目的基因 的DNA片段。 2.将带有目的基因的外源DNA片段连接到能够自 我复制的并具有选择记号的载体分子上，形成重 组DNA分子。 3.将重组DNA分子转移到适当的受体细胞（亦称 寄主细胞）并与之一起增殖。 4.从大量的细胞繁殖群体中，筛选出获得了重组 DNA分子的受体细胞，并筛选出已经得到扩增的 目的基因。 5.将目的基因克隆到表达载体上，导入寄主细胞 ，使之在新
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