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精选优质文档-倾情为你奉上实验二 培养细胞的观察和检测方法一、 细胞计数法 细胞计数法（cell counting）是用来计数细胞悬液中细胞数量的一种方法。一般利用细胞计数板(即血细胞计数板)进行。既可用于分散)细胞培养接种前计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，也可用于对培养物的细胞数量进行计数。不论计数的对象如何，均须制备分散的细胞悬液。（一）制备细胞悬液 原代培养前用机械或化学方法分散组织成为单个细胞悬液。对于悬浮培养的细胞，可直接进行下面的步骤进行计数。如果计数对象为贴壁生长的细胞，首先需将培养物制备成细胞悬液。步骤如下：1) 终止培养，将培养液吸出，用PBS洗培养物一次。2) 给培养瓶内加入1m1 0.25胰蛋白酶溶液，于37消化35 min，期间不断在镜下观察。当细胞变圆接近脱壁时，弃消化液。3) 加人一定量的培养液(如果这些培养细胞不再有用，可加PBS)，用吸管吹打，使细胞脱壁而制成细胞悬液。(二) 计数与计算过程1) 在细胞计数板中央放置计数专用的盖玻片。2) 用玻璃虹吸管吸取细胞，让虹吸管在盖玻片上
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