实验一 实验一 细菌基因组 细菌基因组 DNA DNA 的提取 的提取 一、实验原理 1、核酸的分类 l DNA 主要存在于细胞核的染色体中。核外也有少量DNA ，如线粒体DNA（mtDNA），叶绿体DNA（ cpDNA），质粒DNA。 l RNA 存在于细胞质中，如mRNA, rRNA, tRNA等。 l 除上述DNA，RNA外，还有非细胞形式存在的病毒和 噬菌体，其或只含DNA，或只含有RNA。l 分离纯化核酸总的原则： 应保证核酸一级结构的完整性； 排除其它分子的污染。 l 核酸纯化应达到的要求： 核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高 浓度的金属离子； 其它生物大分子的污染应降低到最低程度； 排除其它核酸分子的污染。 2、核酸制备的一般原则 一、实验原理l 核酸制备时应注意的事项: 尽量简化操作步骤，缩短提取过程。 减少化学因素对核酸的降解。 减少物理因素对核酸的降解：机械剪切力和高温 防止核酸的生物降解。 3、核酸制备的一般原则 一、实验原理l 核酸制备的步骤 ： 破碎细胞 破碎细胞 提取 提取 纯化 纯化 I.材料准备 II.破碎细胞或包膜内容物释放 III.核酸
