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实 验 六 植物总RNA的提取 l 实验原理:LiCl 最终浓度为2 mol/L 0.8 mol/L 直接沉淀大分子RNA (包括rRNA 和 mRNA )需要注意的是Li 离子对反转录酶有 抑制作用,而Cl 离子能抑制蛋白质合成的起 始步骤,所以在mRNA 反转录和体外翻译实 验前不要使用LiCl 沉淀DNA 和RNAl 所用所有试剂: l Tris- CTAB :与RNA 结合 l - 巯基乙醇:防止被氧化 l Tris 饱和酚、氯仿:去蛋白质 l 5L LiCl 、无水乙醇、70% 乙醇、3 mol/L NaAc :使RNA 沉淀 l 1TAE 、 BW :配制凝胶 l Gol-rad 或gold-view 和6loading buffer : 前沿指示剂 l ddH2O l 所有材料 用具 l 试剂瓶 、250 烧杯 玻璃棒 250 容量瓶 记号笔 天平 一次性手 套 钥匙、 l 液氮 研钵、冰、线手套、枪、枪头、高压锅、电泳照相系统 l 离心机 、混摇机、恒温水浴、电泳仪、电泳槽l 实验准备: l 1 、CTAB 5g 直接加入试剂瓶(防止起泡) l 2 、NaCl 20.4
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