显微镜资料.DOC

1、显微镜资料显微镜的种类有很多，常见的有：光学显微镜、电子显微镜、探针显微镜等。光学显微镜又有多种分类方法：按使用目镜的数目可分为双目和单目显微镜；按图像是否有立体感可分为立体显微镜和非立体视觉显微镜；按观察对像可分为生物和金相显微镜等；按光学原理可分为偏光，相衬和微差干涉对比显微镜等；按光源类型可分为普通光、荧光、红外光和激光显微镜等；按接收器类型可分为目视、摄影和视频显微镜等。电子显微镜又可分为扫描电子显微镜、透射电子显微镜等。探针显微镜，产品又包括扫描隧道显微镜、原子力显微镜、横向力显微镜等。金 相 显 微 镜 ：金 相 显 微 镜 主 要 用 于 鉴 定 和 分 析 金 属 内 部 结

2、构 组 织 ， 它 是 金 属 学 研 究 金 相 的 重 要 仪器 ， 是 工 业 部 门 鉴 定 产 品 质 量 的 关 键 设 备 ， 该 仪 器 配 用 摄 像 装 置 ， 可 摄 取 金 相 图 谱 ，并 对 图 谱 进 行 测 量 分 析 ， 对 图 象 进 行 编 辑 、 输 出 、 存 储 、 管 理 等 功 能 。主 要 特 点 ： 用 于 观 察 不 透 明 金 属 ， 矿 石 等 。 根 据 金 属 样 品 表 面 上 不 同 组 织 组 成 物 的光 反 射 特 征 ， 用 显 微 镜 在 可 见 光 范 围 内 对 这 些 组 织 组 成 物 进 行 光 学 研 究

3、并 定 性 和 定 量描 述 。偏 光 显 微 镜偏 光 显 微 镜 ： 用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。 （单 折 射 性 与 双 折射 性 ： 光 线 通 过 某 一 物 质 时 ， 如 光 的 性 质 和 进 路 不 因 照 射 方 向 而 改 变 ， 这 种 物 质 在 光 学上 就 具 有 “各 向 同 性 ”， 又 称 单 折 射 体 ， 如 普 通 气 体 、 液 体 以 及 非 结 晶 性 固 体 ； 若 光 线通 过 另 一 物 质 时 ， 光 的 速 度 、 折 射 率 、 吸 收 性 和 偏 振 、 振 幅 等 因 照 射 方 向 而 有 不 同 ， 这

4、种 物 质 在 光 学 上 则 具 有 “各 向 异 性 ”， 又 称 双 折 射 体 ， 如 晶 体 、 纤 维 等 。 ）注 ： 偏 光 显 微 镜 偏 光 显 微 镜 被 广 泛 地 应 用 在 矿 物 、 化 学 等 领 域 。 在 生 物 学 中 ， 很 多 结构 也 具 有 双 折 射 性 ， 这 就 需 要 利 用 偏 光 显 微 镜 加 以 区 分 。 在 植 物 学 方 面 ， 如 鉴 别 纤 维 、染 色 体 、 纺 锤 丝 、 淀 粉 粒 、 细 胞 壁 以 及 细 胞 质 与 组 织 中 是 否 含 有 晶 体 等 。 在 植 物 病 理 上 ，病 菌 的 入 侵 ，

5、常 引 起 组 织 内 化 学 性 质 的 改 变 ， 可 以 偏 光 显 微 术 进 行 鉴 别 。 在 人 体 及 动 物学 方 面 ， 常 利 用 偏 光 显 微 术 来 鉴 别 骨 骷 、 牙 齿 、 胆 固 醇 、 神 经 纤 维 、 肿 瘤 细 胞 、 横 纹 肌和 毛 发 等 。偏 光 显 微 镜 最 重 要 的 部 件 是 偏 光 装 置 起 偏 器 和 检 偏 器 。 过 去 两 者 均 为 尼 科 尔(Nicola)棱 镜 组 成 ， 它 是 由 天 然 的 方 解 石 制 作 而 成 ， 但 由 于 受 到 晶 体 体 积 较 大 的 限 制 ，难 以 取 得 较 大 面

6、 积 的 偏 振 ， 近 来 偏 光 显 微 镜 则 采 用 人 造 偏 振 镜 来 代 替 尼 科 尔 梭 镜 。 人 造 偏 振 镜 是 以 硫 酸 喹 啉 又 名 Herapathite 的 晶 体 制 作 而 成 ， 呈 绿 橄 榄 色 。 当 普 通 光 通过 它 后 ， 就 能 获 得 只 在 一 直 线 上 振 动 的 直 线 偏 振 光 。 偏 光 显 微 镜 有 两 个 偏 振 镜 ， 一个 装 置 在 光 源 与 被 检 物 体 之 间 的 叫 “起 偏 镜 ”（ 获 得 偏 振 光 ） ； 另 一 个 装 置 在 物 镜 与 目镜 之 间 的 叫 “检 偏 镜 ”（ 检

7、测 偏 振 光 ） 。正 交 检 偏 位 下 的 双 折 射 体 ： 在 正 交 的 情 况 下 ， 视 场 是 黑 暗 的 ， 如 果 被 检 物 体 在 光 学 上 表现 为 各 向 同 性 （ 单 折 射 体 ） ， 无 论 怎 样 旋 转 载 物 台 ， 视 场 仍 为 黑 暗 ， 这 是 因 为 起 偏 镜 所形 成 的 线 偏 振 光 的 振 动 方 向 不 发 生 变 化 ， 仍 然 与 检 偏 镜 的 振 动 方 向 互 相 垂 直 的 缘 故 。 若被 检 物 体 具 有 双 折 射 特 性 或 含 有 具 双 折 射 特 性 的 物 质 ， 则 具 双 折 射 特 性 的

8、地 方 视 场 变亮 ， 这 是 因 为 从 起 偏 镜 射 出 的 直 线 偏 振 光 进 入 双 折 射 体 后 ， 产 生 振 动 方 向 不 同 的 两 种 直线 偏 振 光 ， 当 这 两 种 光 通 过 检 偏 镜 时 ， 由 于 另 一 束 光 并 不 与 检 偏 镜 偏 振 方 向 正 交 ， 可 透过 检 偏 镜 ， 就 能 使 人 眼 看 到 明 亮 的 象 。 光 线 通 过 双 折 射 体 时 ， 所 形 成 两 种 偏 振 光 的 振 动方 向 ， 依 物 体 的 种 类 而 有 不 同 。体 视 显 微 镜 ：体视显微镜的光学结构是由一个共用的初级物镜，对物体成象后

9、的两光束被两组中间物镜-变焦镜分开，它是利用双通道光路，双目镜筒中的左右两光束不是平行，而是具有一定的夹角，为左右两眼提供一个具有立体感的图像，并成一体视角再经各自的目镜成象，它的倍率变化是由改变中间镜组之间的距离而获得的，因此又称为“连续变倍体视显微镜。体视显微镜是拥有立体视觉的显微镜，又可称为实体显微镜、立体显微镜或解剖显微镜。仪器可对包括透光、半透光物体的表面形态或外形轮廓等进行显微立体成像检测研究。用于教学示范，生物解剖，观察分析，电子和精密机械工业零件的装配和检验等荧 光 显 微 镜 ：荧光显微镜是利用一个高发光效率的点光源，经过滤色系统发出一定波长的光(如紫外光3650 入或紫蓝光

10、 4200 入)作为激发光、激发标本内的荧光物质发射出各种不同颜色的荧光后，再通过物镜和目镜的放大进行观察。1.透射式荧光显微镜: 激发光源是通过聚光镜穿过标本材料来激发荧光的。常用暗视野集光器，也可用普通集光器，调节反光镜使激发光转射和旁射到标本上.这是比较旧式的荧光显微镜。其优点是低倍镜时荧光强，而缺点是随放大倍数增加其荧光减弱.所以对观察较大的标本材料较好。（只可用于透光标本）2.落射式荧光显微镜这是近代发展起来的新式荧光显微镜，与上不同处是激发光从物镜向下落射到标本表面，即用同一物镜作为照明聚光器和收集荧光的物镜。光路中需加上一个双色束分离器，它与光铀呈 45 度角，激发光被反射到物镜

11、中，并聚集在样品上，样品所产生的荧光以及由物镜透镜表面、盖玻片表面反射的激发光同时进入物镜，反回到双色束分离器，使激发光和荧光分开，残余激发光再被阻断滤片吸收。如换用不同的激发滤片/双色束分离器/阻断滤片的组合插块，可满足不同荧光反应产物的需要。此种荧光显微镜的优点是视野照明均匀，成像清晰，放大倍数愈大荧光愈强。（可广泛用于透光和不透光标本）主要用于细胞结构和功能以及化学成分等的研究。荧光显微镜的基本构造是由普通光学显微镜加上一些附件(如荧光光源 、激发滤片、双色束分离器和阻断滤片等)的基础上组成的。一般都用高强度的汞灯做激发光源。相衬显微镜：相衬显微镜是一种特殊的显微镜，特别适用于观察具有很

12、高透明度的对象，例如生物切片、油膜和位相光栅等等。光波通过这些物体，往往只改变入射光波的位相而不改变入射光波的增幅，由于人眼及所有能量检测器只能辨别光波强度上的差别，也即振幅上的差别，而不能辨别位相的变化，因此用普通显微镜是难以观察到这些物体的。透明度很高的物体，也称为位相物体。相衬法（也叫位相反衬法）是通过空间滤波器将物体的位相信息转换为相应的振幅信息，从而大大提高透明物体的可分辨性。 （位相：位置，厚度，形状等；振幅：光强，亮度） 。倒置显微镜：倒置显微镜的组成和普通显微镜一样，只不过物镜与照明系统颠倒，前者在载物台之下，后者在载物台之上，用于观察培养的活细胞，具有相差物镜。倒置显微镜和放

13、大镜起着同样的作用，就是把近处的微小物体成一放大的像，以供人眼观察。只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。物体位于物镜前方，离开物镜的距离大于物镜的焦距，但小于两倍物镜焦距。所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身，而是物体被物镜所成的已经放大了一次的倒置显微镜的构造主要分为三部分：机械部分、照明部分和光学部分。用 于 微 生 物 、 细 胞 、 细 菌 、 组 织 培 养 、 悬 浮 体 、 沉 淀 物 等 的 观 察 ， 可 连 续 观 察 细 胞 、细 菌 等 在 培 养 液 中 繁 殖 分 裂 的 过 程 ， 并 可 将 此 过 程 中 的 任 一 形 态 拍 摄 下 来 。 在 细 胞 学 、寄 生 虫 学 、 肿 瘤 学 、 免 疫 学 、 遗 传 工 程 学 、 工 业 微 生 物 学 、 植 物 学 等 领 域 中 应 用 广 泛 。判断选择常用显微镜首先判断研究对象：金属矿物-金相显微镜，其他生物显微镜其次是否需要观察具有立体感，是选择体视显微镜，其他选择非体视如观察高度透明的样品，选择相衬显微镜。判断细胞组织是否含有晶体，是否病变入侵，骨骼，牙齿等或矿石纯度等选择偏光显微镜对细胞结构或化学成分研究一般使用荧光显微镜倒置显微镜主要用于活体的观测