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实时荧光定量 PCR 仪一、实时荧光定量PCR的原 理 荧光定量 PCR 通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行 标记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对 结果进行分析，计算待测样品的初始模板量。 荧光定量 PCR仪 荧光定量PCR仪是一种带有激发光源和荧光信号检测系统的 PCR仪，通常配有电脑系统及相应的分析软件。 定量PCR技术的产生 l 1992年由Higuchi等人第一次报告：使用EB内 插染料法插至双链DNA，经改装的带有冷CCD 的PCR仪检测样品的荧光强度 l PCR循环 = 双链DNA = 染料 = 荧光 l 后来用与双链DNA有更强结合力的SYBR Green I取代EB 荧光定量实时PCR与普通PCR的比较 l 实时在线监控 对样品扩增的整个过程进行实时监控，能够实 时地观察到产物的增加，直观地看到反应的对 数期 l 降低反应的非特异性 使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合， 提高了PCR反应的特异性 l 增加定量的精确性 全程监控，准确的算法进行定量 l 结果分析更加快捷方便，无需跑胶 罗氏产品介绍以及 与同类产品之间的 对比一、LC
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