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1 1 第二章 基因工程的载体 和工具酶 第一节载体2 2 引 言 基因克隆的本质是使目的基因在特定的条件下得到扩 增和表达,而目的基因本身无法进行复制和表达、 不易进入受体细胞、不能稳定维持,所以就必须借 助于“载体”及其“寄主细胞”来实现。 作为基因克隆的载体必须具备以下特性: 载体必须是复制子。-(在低等生物中复制的要求) 具有合适的筛选标记,便于重组子的筛选。(是否为生物生 存必需的?) 具备多克隆位点(MCS),便于外源基因插入。 自身分子量较小,拷贝数高。 在宿主细胞内稳定性高。 (6)无害性:对于载体(不能超片段长度限制)和宿主。3 3 Characteristics of vectors for gene cloning MCS Marker Foreigngene4 载体的分类 一、病毒载体和非病毒载体 非病毒载体: 质粒 噬菌体载体 黏粒载体 人工染色体 二、克隆载体和表达载体 克隆载体是以保存基因为目的的载体 三、游离载体和整合载体 四、穿梭载体 P105 5 一、质粒载体 (plasimidvectors) (一)质粒载体的生物学特性 (二)质粒载体的制备 (三
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