核酸的序列测定 第五章 易发平 基础医学院生物化学与分子生物学教研室 DNA的测序是分子生物学研究中非常重要和关键的内 容。对DNA一级结构的研究，有助于探索基因结构与功 能、基因与疾病关系，进而推动生命科学研究获得质的 飞跃。测定基因组的全部核苷酸序列、阅读和分析全部 遗传信息，正是人类基因组计划（human genome project, HGP)的最主要目标之一。将DNA片段用荧光等分析仪，测出DNA序列碱基排 列顺序。 DNA序列测定方法： v 1.Sanger的双脱氧法：A/T/G/C四个反应。 v 2.化学降解法：G反应；G+T反应；T+C反应和C反 应。 v 3.自动测序法。DNA 测序的主要方法有两种，即双脱氧链终止法（Sanger 法、酶促法）和化学裂解法（Maxam-Gelbert 法）。二者 均依赖于高分辨率的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）。 不管是酶促法还是化学法，都是分为4个反应体系进行测序 反应，寡核苷酸链分别终止于不同位置的A、T、G或C碱基 。4种反应体系的寡核苷酸链产物，进行变性聚丙烯酰胺凝 胶电泳，放射自显影后，读出待测DNA的连续序列。一、 S
