疫苗分离纯化技术 宫喜魁为什么? 疫苗生产过程中不可避免的有一些杂质,如细菌菌 体、细胞碎片、血清、杂蛋白、核酸等。 为了得到具有高纯度、无菌性和安全性的疫苗,要除 去这些杂质。有哪些? 传统疫苗的分离纯化方法 连续离心、沉淀、过滤或萃取等物理、化学方法。我国 采用酸沉淀法生产百日咳灭活疫苗,就是由菌体培养液 加甲醛杀菌灭活后,用HCl调pH至3.84.4,静置十几小 时自然沉淀出菌体和可溶性抗原,再离心、洗涤而得。 现代分离纯化技术 膜过滤、分子筛层析、离子交换层析、亲和层析等怎么样? 传统纯化分离技术 盐析 盐析一般是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度 降低而析出的过程。 如:加浓(NH4) 2 SO4使蛋白质凝聚的过程。 盐析可以通过各种物质的溶解度的不同进行分离,但是 溶解度相同或差异不大很难进行分离。 酸沉淀 酸沉淀是指溶液的ph改变,使得溶液中某些物质的溶解 度降低,从而凝聚沉淀。 过酸容易使得蛋白质变性。 超速离心 蔗糖、CsCl、KBr密度梯度离心 处理样品量太少、操作复杂、难以控制 采用此技术纯化嗜血流感细菌(Haemophilus influenzae)外膜脂蛋