精选优质文档-倾情为你奉上实验九 甲醛滴定法测定氨基酸一、目的掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作要点。 二、原理氨基酸是两性电解质,在水溶液中有如下平衡:H3N+RCOOH2NRCOO+H+-NH是弱酸,完全解离时pH为1112或更高,若用碱滴定-NH所释放的H+来测量氨基酸,一般指示剂变色域小于10,很难准确指示终点。常温下,甲醛能迅速与氨基酸的氨基结合,生成羟甲基化合物,使上述平衡右移,促使-NH释放H+,使溶液的酸度增加,滴定终点移至酚酞的变色域内(pH9.0左右)。因此,可用酚酞作指示剂,用标准氢氧化钠溶液滴定。R-CH(COO)-NHR-CH(COO)-NH2+H+中和R-CH(COO)-NH2R-CH(COO)-NHCH2OHR-CH(COO)-N(CH2OH)2 如样品为一种已知的氨基酸,从甲醛滴定的结果可算出氨基氮的含量(脯氨酸与甲醛作用生成不稳定的化合物,使滴定mL数偏低。酪氨酸的滴定mL数偏高)。如样品是多种氨基酸的混合物,如蛋白水解液,则滴定结果不能作为氨基酸的定量依