精选优质文档-倾情为你奉上耐热多应用在PCR技术中。各种耐热DNA聚合酶均具有5-3聚合酶活性，但不一定具有3-5和5-3的外切酶活性。3-5外切酶活性可以消除错配，切平末端;5-3外切酶活性可以消除合成障碍。由于上述这些不同，可以将耐热DNA聚合酶分为三类：一、普通耐热DNA DNA 聚合酶由一种水生栖热菌yT1株分离提取出，是发现的耐热DNA聚合酶中活性最高的一种，达200,000单位/mg。具有5-3外切酶活性，但不具有3-5外切酶活性，因而在合成中对某些单错配没有校正功能。TaqDNA聚合酶还要具有非模板依赖性活性，可将双链产物的每一条链3加入单核苷酸尾，故可使PCR产物具有3突出的单A核苷酸尾;另一方面，在仅有dTTP存在时，它可将平端的质粒的3端加入单T核苷酸尾，产生3端突出的单T核苷酸尾。应用这一特性，可实现PCR产物的T-A克隆法。Tth 聚合酶从Thermus philus HB8中提取而得，该酶在高温和MnCl2条件下，能有效地逆转录RNA;当加入Mg2+后，该酶的聚合活性大大增加，从而使cD
