细胞培养(四) 暨 南 大 学 医 学 院 生物化学教研室 费 嘉(一)培养细胞污染的判定与排除 污染的定义 -按现代的观念,凡是混入培养环境中对细 胞生存产生有害的成分和造成细胞不纯的 异物都应该视为污染。 污染物的种类 v微生物(真菌、细菌、病毒和支原体) v化学物质(影响细胞生存、非细胞所需 的化学成分) v细胞(非同种的其他细胞) 污染途径 v1 空气:空气是微生物及尘埃颗粒传播的 主要途径。 - 培养设施不能设在通风场所。 - 无菌操作应在净化台内进行,工作时要带口 罩,以免因讲话、咳嗽等使外界污染进入操作 面,造成污染。超净工作台v2 器材:各种培养器皿、器械消毒不彻底 和洗刷不干净导致污染,另外需要对培 养箱进行定期消毒,防止形成污染v3 操作: o 实验操作无菌观念不强 o 技术不熟练 o 使用污染的器皿或封瓶不严 o 培养两种以上细胞时,操作不规范,交叉使用 吸管或培养液、培养瓶等导致细胞交叉污染。v4 血清:有些血清在生产时就已经被支原 体或病毒等污染。 v5 组织样本:原代培养的污染多数来源于 组织样本;取材时碘酒消毒后脱碘不彻 底,可造成碘混入组织、细胞或培养液