蛋白表达概述Michael Chao常用蛋白表达系统(host) 原核细 胞:大肠 杆菌。真核细 胞:酵母、昆虫细 胞、哺乳动 物细 胞大肠 杆菌表达系统 大肠 杆菌是基因工程研究中采用最多的原核表达体系。优 越性:对 大肠 杆菌的基础 生物学、分子遗传 学等背景知识 和基因表达的调 控机理已有了深刻了解;商品化的载 体和菌株种类 非常齐 全;表达效率高;易培养,成本低。缺点:因分泌能力不足,真核蛋白质 常形成不溶性的包含体;蛋白质 不能糖基化;其内毒素很难 除去。 酵母表达系统 甲醇酵母表达系统 是目前应 用最广泛的酵母表达系统 ,以Pichia Pastoris 应 用最多。优 越性:蛋白可糖基化,有相对 正确的天然结 构,可很好的生产 分泌型蛋白;表达载 体为 整合型质 粒,载 体中含有与酵母染色体中同源的序列,因而比较 容易整合入酵母染色体中,实现 高效率表达;表达载 体都为E.coli/Pichia Pastoris 的穿梭载 体,可在获 得克隆后采用E.coli 细 胞大量扩 增。易培养,成本低, 可高密度发 酵。缺点:糖基化与哺乳动 物有所差别 ;培养上清多糖浓 度高,不