实验 双缩脲法测定蛋白质浓度实验目的1.学习分光光度法测定的原理和方法2.学习蛋白质含量测定的原理和方法3.掌握双缩脲法测定蛋白质含量的方法原理:物质的电子结构不同,所能吸收光的波长也不同,这就构成了物质对光的选择吸收基础。根据物质对光的吸收特征和吸收强度,对物质进行定性和定量的分析方法,常用紫外可见分光光度法。光的电磁波性质 光的电磁波性质射线x射线紫外光红外光微波无线电波10-2 nm 10 nm 102 nm 104 nm 0.1 cm 10cm 103 cm 105 cm可 见 光分光光度法定性分析与定量分析的基础 物质对光的选择吸收A在一定的实验条件下,物质对光的吸收与物质的浓度成正比。AC增大定性分析基础定量分析基础I0I参比样品入射光 I0透射光 Ip 一束单色光通过溶液介质后,光能被吸收一部分,吸收多少与溶液的浓度和厚度成正比。p在一定的实验条件下,物质对光的吸收与物质的浓度成正比。LambertBeer 定律A=CLT(透射比)=I/I0=10- CLlg(1/T)= CLA为吸光度;为吸收系数;C为溶液浓度;L为溶液光程的厚度应用(1)比较吸收光谱曲线 (2)比较最