精选优质文档-倾情为你奉上流式细胞术实验目的掌握流式细胞仪的工作原理掌握用流式细胞仪测量细胞群体DNA含量分布的方法了解流式细胞术在细胞生物学研究中的应用实验原理 流式细胞仪的工作原理是将待测细胞放入样品管中,在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出,形成细胞柱。通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测,得到该细胞的光散射和荧光指标,分析出其体积、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等物理及化学特征。 细胞内的DNA含量随细胞周期进程发生周期性变化,如G0/G1期的DNA含量为2C,而G2期的DNA含量是4C。利用PI标记的方法,通过流式细胞仪对细胞内DNA的相对含量进行测定,可分析细胞周期各时相的百分比。仪器、材料与试剂仪器:流式细胞仪、离心机。材料:Hela细胞样品、试管、离心管、封口膜、微量移液器、Tip头、Eppendorf管。试剂:70乙醇(保存于4),RNase(-20保存),PI染液(避光保存于-20),PBS(pH 7.4,保存于4)实验步骤