精选优质文档-倾情为你奉上考马斯亮蓝法测定蛋白浓度一、实验原理考马斯亮蓝G250比色法,也被称为Bradford法是常用的一种蛋白质浓度的测定方法。考马斯亮蓝G250是一种染料,能与蛋白质通过疏水作用结合,形成蛋白质-染料复合物,颜色由红色转变为蓝色,最大光吸收波长为595nm,并且在低浓度范围(0.011.0mg/mL)内,与蛋白质浓度的关系服从比尔定律。二、实验材料1、实验设备电子天平、分光光度计、恒温水浴锅2、试剂考马斯亮蓝G250、牛血清蛋白、NaCl、95%乙醇、85%磷酸三、操作步骤(一)试剂配制1、考马斯亮蓝G250溶液配制准确称取0.1 g考马斯亮蓝G250,溶于50mL 95%乙醇,加入100mL 85%磷酸,最后用蒸馏水稀释定容到1000mL。备注:考马斯亮蓝G250溶液的用量100mL足够。2、牛血清蛋白溶液配制 准确称取50mg牛血清蛋白,加入0.526gNaCl,溶于少量蒸馏水中,然后稀释定容到500mL,配制成浓度为100 g/mL的牛血清蛋白原液。(二)标准曲线的制作1、