DNA的琼脂糖凝胶电泳资料ppt课件.ppt

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DNA的琼脂糖凝胶电泳 酶切体系(L ) 对 照体系(L )DDW 13 14Buffer 2 2EcoRI 1 0DNA 4 41. 酶切 (1)酶切体系(2)37水浴40 min2.琼 脂糖凝胶电 泳(注意:各组 分加入顺 序:DDW, Buffer, EcoR , DNA 。)一、实验原理l 电泳(electrophoresis)是荷电溶质或粒子在电场作用下发生定向泳动的现象。l 电泳分离是利用荷电溶质在电场中泳动速度的差别进行分离的方法。l 根据其载体介质的不同可分醋酸纤维薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳等。l 核酸的分离和鉴定通常采用琼脂糖凝胶电泳。l DNA分子在pH值高于其等电点的溶液中带负电荷,在电场中通过琼脂糖凝胶向阳极移动。l 不同大小、不同形状和不同构象的DNA分子在相同的电泳条件下(如凝胶浓度、电流、电压、缓冲液等),有不同的迁移率,所以可通过电泳使其分离。TBE缓冲液,pH8.3DNA在电场中的迁移率的影响因素l 1)DNA的分子大小、形状、构象。l 2)琼脂糖的浓度。l 3)所加电压。l 4)嵌入的染料。l 5)电泳缓冲液的组成。l 琼脂糖凝胶电

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