DNA的提取及鉴定ppt课件.ppt

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DNA的提取及鉴定一、动物肝脏中DNA的提取一 . 实验目的 学习和掌握用浓盐法从动物组织中提取DNA的原理和技术 了解分离提取DNA的一般原理DNA的主要来源1.动物组织及器官:脾、肝、胸腺、鱼类精子等。2.植物:种子的胚芽等3.微生物:细菌、酵母菌等 核酸和蛋白质在生物体中以核蛋白的形式存在,其中DNA主要存在于细胞核中,RNA主要存在于核仁及细胞质中。核酸提取的主要步骤:1.破碎细胞:研磨、组织匀浆、超声波、冻融;一硫氰酸胍、碱裂解;酶解(溶菌酶)2.除去与核酸结合的蛋白质以及多糖、脂类等生物大分子:酚/氯仿抽提、蛋白质变性(SDS、异硫氰酸胍等)、蛋白酶处理、高盐洗涤3.除去其他不需要的核酸分子4.沉淀核酸,去除盐类,有机溶剂等杂质 生物体组织细胞中的脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),大部分与蛋白质结合,以核蛋白脱氧核糖核蛋白(DNP)和核糖核蛋白(RNP)的形式存在,这两种复合物在不同的电解质溶液中的溶解度有较大差异。在低浓度的NaCl溶液中,DNP的溶解度随NaCl浓度的增加而逐渐降低,当NaCl浓度达到0.14mol/L时,DNP的溶解度约为纯水中溶解度的1%(

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