临床ELISA 的基本原理和方法及免疫学的发展 毛人辉 2010.1ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay ) 酶联接免疫吸附实验 (Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay) : 指以酶作为标记指示物的免疫测定技术，根据其测定中是否需要分离洗涤步骤来分开结合和未结合的抗原或抗体，而分为固相和均相两大类方法。 ELISA 原理 以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体 聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。即: 用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA 双抗体夹心法及ELISA 间接法。 操作步骤( 一) 双抗体夹心法( 检测未知抗原) 1. 包被：用0.05M PH9. 牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含
