精选优质文档-倾情为你奉上目的基因片段的PCR扩增与克隆1. PCR技术Polymerase Chain Reaction 聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程，在有DNA模板、DNA聚合酶（Taq酶）、RNA引物和四种dNTP的情况下，通过高温变性（9095，12min）,低温退火（2537，12min）,中温延伸（6075，90 sec-5min）,这样反复循环的过程中，在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。1）、PCR反应成分：Taq DNA聚合酶 引物浓度：一般0.1-0.5mol/L dNTP:一般为50200mol/L Mg2+ 模板：PCR对模板的要求不高，单、双链DNA均可，但样品中不能混有蛋白酶、核酸酶、DNA聚合酶抑制剂以及能与 DNA结合的蛋白质。 添加剂：DMSO（二甲基亚枫），提高扩增效率及特异性（1） 理论上PCR合成产物的数量经过每轮循环都将增加一倍，应按2n的指数方式递增，PCR反应30轮循环后，PCR扩增应达
