核酸扩增技术主要内容第一节 聚合酶链反应技术第二节 荧光定量PCR技术第三节 其他核酸扩增技术第四节 临床基因扩增实验室的管理与质量控制第一节 聚合酶链反应技术 POLYMERASE CHAIN REACTION, PCR一、 PCR技术发展简史二、 PCR技术原理三、 PCR反应体系、条件及其优化四、 扩增产物检测及分析五、 PCR常见问题与原因分析六、 PCR衍生技术PCR技术发展简史 1985年Kary Mullis等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应,使用的DNA聚合酶是Klenow片段。 1986年Randall Saiki 发现taq dna聚合酶,从此pcr技术得以广泛应用。(1993年诺贝尔化学奖获得者) 基本原理 PCR反应体系、条件及其优化 PCR反应体系 模板(Template) 引物(Primers) DNA 聚合酶 (DNA Polymerase) dNTP(ATP, CTP, TTP, GTP) PCR缓冲液(PCR Buffer) PCR反应条件 变性 退火 延伸 循环 DNA RNA :总RNA 、mRNA 、tRNA 、rRNA 、病毒RNA基因组DN