1、开题报告TAAR1通过影响 A型钾通道引起外周痛觉过敏及机制研究学生：秦文娟导师：陶金 教授1234研究背景研究背景实验方法和内容实验方法和内容实验结果与分析实验结果与分析研究假设研究假设目录：研究背景：研究背景：n TAAR:Trace amine-associated receptoru G蛋白偶联受体u 配体：痕量胺 存在于动物神经系统中， 浓度 0.1-10nM,含量小于生物胺 1%生物胺 如多巴胺， 5-HT,去甲肾上腺素药物：苯丙胺及相关化合物 治疗精神疾病等u 与配体的亲和力： tyramine dopaminehistamine, serotonin 研究背景：研究背景：n 生
2、物胺在疼痛中发挥重要作用： 5-HT可以促进外周疼痛敏感性。 中枢多巴胺功能紊乱与疼痛相关。 去甲肾上腺素参与痛觉过敏。研究背景：研究背景：n 参与外周疼痛的离子通道：研究假设：研究假设：TAAR1生物胺 A-type K疼痛?Tyramine TAAR1 A-type K PAINEPPTB实验方法和内容：实验方法和内容：n 动物：ICR小鼠， 5-7周，雌鼠：雄鼠 =1:1n 药物：u Tyramine用乙醇配置成 1M储存液u 其余溶于水的药物用钾外液配置成高浓度储存液，难溶于水的药物用 DMSO配置成高浓度储存液。u 药物现用现配，用钾外液 /台式液 /NS稀释储存液至目的浓度。实验方
3、法和内容：实验方法和内容：n 三叉神经元培养： 小鼠断头，冰上取三叉神经； 33.5 恒温，通氧，胶原酶 1.5mg/ml消化45min,胰酶 1mg/ml消化 30min； 巴斯管吹打后，神经元均匀悬浮在 DDB中； 将悬浮神经元均匀滴在 24孔板中的爬片上，静置 1h待用。实验方法和内容：实验方法和内容：n Patch-Clamp：l 记录 A-type K电流用电压钳，记录兴奋性用电流钳。l 膜电位 -60mV。l 阻断剂孵育 30min后开始记录。n Western blot:l TAAR1在三叉神经元中的表达l 造模后信号通路中蛋白表达水平的检测n Immunohistochemistryl TAAR1在哪些三叉神经元中表达 TAAR1与 NeuF,CGRP,IB4,NF200共表达l TAAR1通过哪些 A-type K亚型发挥作用 TAAR1与 KV4.1， KV4.2， KV4.3的共表n 行为学l Von Frey测小鼠脸部的痛觉 Tyramine给药后痛觉行为学变化 TAAR1被干扰后的痛觉行为学变化实验方法和内容：实验方法和内容：
