琼脂糖凝胶电泳检测DNA丁新伦13067206406【一】背景知识凝胶电泳是分离和纯化DNA片段最常用的技术；分离、鉴定和提纯核酸首选的标准方法。根据制备凝胶的材料: 琼脂糖电泳凝胶电泳 聚丙烯酰胺电泳【二】实验目的n学习琼脂糖凝胶电泳分离DNA的原理和方法n检测碱裂解法提取质粒的结果n检测双酶切法鉴定重组质粒的结果n检测PCR法鉴定重组质粒的结果【三】实验原理（1）某物质 在电场 作用下的迁移速度叫做电 泳的速率，电 泳的速率与核酸分子大小和构型有关。DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷，在外加电场作用下向正极泳动。分子质 量越小跑得越快，紧密构型快于松散型开环 分子或线 性分子，从而可以分离大小不同的DNA 或RNA 分子。（2）琼脂糖是一种线性多糖聚合物，可以形成具有刚性的滤孔，凝胶孔径的大小决定于琼脂糖的浓度。浓度越高，孔隙越小，其分辨能力就越强。琼脂糖浓度琼脂糖浓度(%)(%)线型线型DNADNA分子的分离范围分子的分离范围(Kb)(Kb)0.3 0.3 5 5 60 600.6 0.6 1 1 20 200.7 0.7 0.8 0.8 10 100.9 0.9 0.5 0.5
