精选优质文档-倾情为你奉上基本概念及原理Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用电泳分离经消化的片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记进行，用或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量12。基本方法及主要步骤Southern印迹杂交的基本方法包括四部分，以下以植物southern印迹杂交为例。（1）植物基因组DNA提取；（2）DNA的限制性内切酶酶解、电泳和Southern转移；（3）探针的标记和纯化；（4）杂交、洗膜、检测以及去除膜上探针。主要操作步骤：1琼脂糖电泳（1）取一定量的待测DNA样品，用适当的限制性内切酶酶切。DNA的量根据样品的种类及实验目的的不同而异，对于克隆片段的限制性内切酶图谱分析，取0.1-0.5g即可；而对于鉴定基因组DNA中的单拷贝基因序列，则需要1020g；当采用寡核苷酸探针或探针的比放射性活性较低时，则需要3050g。（2）
