精选优质文档-倾情为你奉上外周血单核细胞流式分析(1) 采集小鼠眼血，每只小 300-500l，新鲜外周血2500rpm 离心20 分钟，吸取上层血浆；(2) 用PBS 或生理盐水重悬下层血细胞，稀释倍数2-4 倍，稀释倍数越高分离效果越好；(3) 离心管内加入Ficoll，Ficoll 上层缓慢的加入重悬细胞液，Ficoll 与重悬细胞液比例1:2；(4) 2000rpm 离心 20 分钟，离心机设置为缓慢加速和缓慢减速；(5) 离心后离心管内可见四层分液，从上向下依次为：PBS 血浆混合液、PBMC、Ficoll、红细胞，Z 字形吸取 PBMC 分层；(6) PBS 或生理盐水清洗细胞三次并计数；(7) 将细胞用 PBS 重悬，分组加入流式管中，每管100l；(8) 加入抗 CD16/32 封闭抗体，4反应 10min，除去小鼠免疫细胞表面的非特异性染色；(9) 根据抗体要求体积在流式管内加入抗体，常见的大比例细胞可只标记检测抗体，以下几种情况需要同时制备空白细胞管、同型对照管、检测抗体管检测：细胞比
