第四章聚合酶链式反应 聚合酶链反应( Polymerase Chain Reaction, PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、 快速、 简便、重复性好、易自动化等突出优点。 1971年,Khorana提出: DNA经过变性,与合适引物杂交,用DNA聚合酶延伸引物,并不断重复该过程便可克隆tRNA基因。 但由于测序和引物合成的困难,以及70年代基因工程技术的发明使克隆基因成为可能,所以,Khorana的设想被人们遗忘了4.1 PCR技术简史4.1 PCR技术简史 1985年,美国PE-Cetus公司Mullis等人发明了聚合酶链反应(PCR) 基本原理是在试管中模拟细胞内的DNA复制 最初采用E-coli DNA聚合酶I 的Klenow片段进行PCR,4.1 PCR技术简史 1988年Saiki 等从水生嗜热杆菌中提取到一种耐热-Taq DNA聚合酶 Taq DNA聚合酶的应用使得PCR能高效率的进行,PE-Cetus公司推出了第一台PCR自动化热循环仪。 1993年,Mullis因此项技术获诺贝尔化学奖727294945555PCRPCR循环