实验十九、纸色谱实验二十、氨基酸的纸 上电泳一、目的与要求:1、了解纸色谱的基本原理。2、学习用纸色谱法分离氨基酸的一般操作。3、了解电泳的基本原理,学会纸上电泳的操作方法。4、初步掌握用纸上电泳法分离鉴定氨基酸。 二、基本原理u (一)纸色谱是一种分配色谱。滤纸作为载体,纸纤维上吸附的水为固定相,与水不相混溶的有机溶剂作为流动相。 当样品点在滤纸的一端,使流动相从有样品的一端上行,通过毛细管作用,流向另一端时,依靠溶质在两相间的分配系数不同而达到分离。极性大的组分在固定相中分配得多,随流动相移动速度慢,极性小的在流动相中分配得多,随流动相移动速度快一些。 三、纸色谱实验步骤(观看录像)1、点样;2、展开;3、显色与结果处理计算出两个物质的Rf值。 纸色谱图u (二)在一定的条件下,带电的质点在电场作用下,向着与其所带电荷相反的电极移动,这种现象称为电泳。 不同氨基酸在同一pH 值的溶液中,所带的电荷不同。在同一电场中,带不同电荷的各个氨基酸泳动的方向和速度不相同,因此将不同的氨基酸在同溶液中进行电泳时,由于各个氨基酸移动的方向和距离都不相同,从而达到分离鉴定的目的。四、纸上电泳实验