1. 目的 DNA 片段 质 粒 TA 载 体5. 连 接 重组质 粒目的 DNA6. 转 化无质 粒的E.Coli 死亡 有质 粒的E.Coli 存活含抗生素培养基中生长2. PCR 2-3min平板筛选实验课 安排质 粒提取7. 酶切实验报告要求1. 最后2学时进行实验课考试(20分)2. 开卷, 但不许抄袭其它同学试卷。3. 内容为两个实验: 实验目的、主要步骤(简答)、(3分) 结果(画图)、结果分析、 (4分) 有关实验的问答题(注意听讲)(3分) 4. 收卷时签名。实验一、 基因组DNA的提取、电泳第一部分:肝组织制备及蛋白酶K消化第二部分:酚氯仿抽提及乙醇沉淀第三部分:DNA琼脂糖凝胶电泳预 期结 果 1 2 3 4 5 Marker总 DNA如果是 如果是SmearSmear带带 , ,说说 明所提基因 明所提基因组组DNADNA 的断裂 的断裂现现 象 象严严 重 重。 。 思考题:1. 实验中所用到的各试剂的作用是什么? 氯仿, 乙醇, EDTA2. DNA提取过程中应注意什么?凝胶成像系统 :凝胶成像系统 :实验二、 PCR扩增特定基因片断 实验背景 基本原理 P