蛋白质浓度测定(考马斯亮蓝结合法) 一、实验目的: 蛋白质是细胞中最重要的含氮生物大分子之一,承担着各种生物功能。蛋白质的定量分析是蛋白质构造分析的基础,也是农牧产品品质分析、食品营养价值比较、生化育种、临床诊断等的重要手段。根据蛋白质的理化性质,提出多种蛋白质定量方法。考马斯亮蓝G250法是比色法与色素法相结合的复合方法,简便快捷,灵敏度高,稳定性好,是一种较好的常用方法。 通过本实验学习考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量的原理,了解分光光度计的结构、原理和在比色法中的应用。蛋白质浓度测定方法1. 凯氏定氮法2. 双缩脲法3. Folin-酚法4. 紫外光吸收法5. 考马斯亮蓝结合法6. BCA法二、实验原理: 考马斯亮蓝G250是一种染料,在游离状态下呈红色,当它与蛋白质结合后变为青色。蛋白质含量在5100g范围内,蛋白质一色素结合物在 595nm下的吸光度与蛋白质含量成正比,故可用比色法测定。 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250 在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当