血清IgG的分离和制备盐析法实验原理n 1. IgG : 是免疫球蛋白 (Immunoglobulin, IgG ,E ,M ,A ,D )的主要成分之一。(免疫球蛋白也叫-球蛋白 )盐析(salting-out)n 盐溶(Salting in ):蛋白质在纯水或低盐溶液中溶解度较低,若稍加一些无机盐则溶解度增加,这种现象称为“盐溶” .n 盐析(salting-out):而当盐浓度继续增加到某一浓度时,蛋白质又变得不溶而自动析出,这种现象称为“盐析”(Salting out) 原理n 蛋白质是亲水胶体,带有羧基解离的负电荷或氨基解离的正电荷,其极性基团使分子间相互排斥,同时与水分子形成水膜,这些因素保证蛋白质形成溶于水的溶胶状态。 n 当加入少量盐时,增多了蛋白质分子上的极性基团,因而增大了蛋白质在水中溶解度,出现“盐溶”现象 n 但当盐浓度增加到一定浓度时,一方面大量的水同盐分子结合,使得蛋白质没有足够的水维持溶解状态,破坏了维持蛋白质亲水胶的水膜,容易沉淀出来 ;n 另一方面加入的盐离子中和了蛋白质分子相互碰撞时即发生相互聚集沉淀出来,这样就出现了“盐析”现象。 盐析n 各种蛋白