羟自由基清除率测定(共2页).docx

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精选优质文档-倾情为你奉上抗氧化活性的测定(参考)测定活性物质对羟自由基的清除率(羟自由基清除试验)采用Fenton试剂:过氧化氢/亚铁盐。原理:H2O2与亚铁离子反应生成OH,OH自由基一般存活时间比较短,具有较高的反应活性。当在反应体系中添加水杨酸,便能快速的捕捉OH而产生紫色化合物(2,3-二羟基苯甲酸),该有色化合物在510nm处有较大吸收峰,测其吸光度可表示羟自由基(OH)的多少,吸光度与羟自由基(OH)的量成正比。反应体系中若加入羟自由基(OH)清除剂后,被氧化的水杨酸减少,则体系颜色变浅甚至消失,吸光度变小。操作:样品处理:蔬菜水果切分,榨汁(切分后可放在2%的盐酸或草酸溶液中护色)。将蔬菜汁或果汁放入50ml离心管中(如有颜色加适量活性炭或白陶土),在3000 4000rpm下离心10min 20min后(若样品蛋白含量较高,需加适量乙酸锌,亚铁氰化钾)快速过滤,滤液备用。取25ml比色管2支(样品管、空白管),分别加入5ml1mmol/L硫酸亚铁溶液、5ml3mmol/LH2O2溶液,样品管中加入1ml样品溶液,空白

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