精选优质文档-倾情为你奉上菌落PCR资料PCR, 菌落, 资料菌落PCR菌落PCR与我们通常的普通DNA的PCR的不同在于，直接以单个菌作为模板。是一种可以快速鉴定菌落是否为含目的质粒的阳性菌落。操作简单，快接，阳性率较高，在转化鉴定中较常见。操作方法：1，挑取单个菌落，可以用高压灭菌的牙签。现在含抗性的平板上画线，做保种用，然后置于20ultritonx100中搅和一下，将相应的菌和板子上的画线区做上对应的记号2，将装有20ulTritonx100的EP管100度煮2分钟3，按照菌中预期包含的质粒加好PCR体系，建议做20ul体系，模板加煮过的菌的上清1ul4，上机即可。退火温度可以稍低，虽然没有什么根据可言，但是个人经验，推荐比质粒PCR时稍低5，电泳，看结果，阳性的菌落对应的板子可以直接挑菌小摇，保种或者送测序都可以 我的做法是：用枪头挑选单菌落到装有20uL水的pcr管中，然后悬浮菌液。在做PCR时，吸取1uL做摸板，但电泳检测后，选有阳性克隆相对的菌液10uL与试管的液体培养基中培养。这样做， 既初步检测了阳
