一人类外周血染色体标本制备一ppt课件.ppt

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资源描述

实验一 人类外周血染色体标本制备 一、实验目的初步掌握人类染色体标本培养和制备的基本方法。 二、实验原理 正常情况下,外周血中的小淋巴细胞,几乎都处在G1期或G0期,外周血细胞中是没有分裂相的。1960年发现外周血中的小淋巴细胞可以在植物血凝素(phytohaemagglutinin, PHA) 分裂刺激剂的影响下,在形态上转变为淋巴母细胞,进行有丝分裂。这样经过短期培养,秋水仙素的处理,低渗和固定,就可以迅速而又简便地获得体外生长的细胞群体和有丝分裂相。本方法已为临床医学、病毒学、药理学、遗传毒理学等方面广泛应用。三、实验步骤、采血(已完成)、培养(lymphocytescellculture )(已完成)RPMI1640 培养液,370.5恒温中培养72小时。3、秋水仙素(colchicine) 处理在终止培养前- 小时,加入秋水仙素。(已完成)4、离心(centrifugalization)以1000rpm 离心10分钟,弃上清,留沉淀并用吸管打匀。 、低渗处理(hypotonic treatment ) 加毫升预温(37 ) 的0.075MKCl 低渗液(hypotonic s

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