RNA的定量测定方法(共2页).doc

精选优质文档-倾情为你奉上RNA的定量测定紫外(UV)吸收法一、实验目的 1. 掌握紫外线（UV）吸收法测定核酸浓度的原理。2. 熟悉紫外分光光度计的使用方法。二、实验原理核酸及其衍生物，核苷酸、核苷、嘌呤和嘧啶有吸收UV的性质，其吸收高峰在260nm波长处。测得未知浓度核酸溶液的A260nm值，即可以计算出其中RNA或DNA的含量。该法操作简便，迅速，并对被测样品无损，用量也少。三、 实验步骤样品做适当倍数的稀释（保证吸光度值读数在0.3-0.6），将稀释液于厚度为1cm的石英比色杯，在260nm波长处测定A值。以蒸馏水做空白。四、计算 式中：A260为稀释液在260nm波长处A值读数N为稀释倍数.0.024（或0.020）表示1mg/ml RNA（或DNA）溶液测定的A260值相当于0.024。专心-专注-专业