动力学/ 亲和力分析基础知识介绍Biacore Training什么是动力学和亲和力? 动力学 反应发生的速度? 与时间相关 结合 分子间结合的速度 解离 分子复合物解离的速度 动力学分析能够确定在一个给定的时间跨度内,分子复合物是否能够结合还是完全解离 亲和力 分子间结合的强度? 与时间无关 亲和力分析能够确定反应处于平衡状态(结合与解离形成动态平衡)时,复合物的浓度2Biacore Training动力学分析和亲和力分析的相关性? 细胞本身就是一个动态系统 极少处在平衡状态 同样的亲和力,不同的反应,动力学数据一般并不相同 动力学数据提供了更多的信息3Biacore Training同样的亲和力,不同的动力学 所有4 个化合物的亲和力数据相同 KD = 10 nM = 10-8 M 结合动力学常数可有不同数量级范围内的改变,本例中为4 个数量级kon koff (M-1s-1) (s-1)106 10-2105 10-3104 10-4103 10-5时间浓度 = 1000 nM30 min60 min所有靶位点被占据Response时间30 min60 min浓度 = 100 n