实验二、总糖和还原糖的测定3,5 二硝基水杨酸法目的要求 掌握还原糖和总糖的定量测定原理,学习用比色法测定还原糖的方法实验原理 在NaOH 和丙三醇存在下,3,5 二硝基水杨酸(DNS )与还原糖共热后被还原生成氨基化合物。在过量的NaOH 碱性溶液中此化合物呈桔红色,在540nm 波长处有最大吸收,在一定的浓度范围内,还原糖的量与光吸收值呈线性关系,利用比色法可测定样品中的含糖量。实验内容 葡萄糖标准曲线的制备 样品中还原糖的提取和含量测定 样品中总糖的水解、提取和含量测定注意事项:标准曲线制作与样品含糖量测定应同时进行,一起显色和比色1 、葡萄糖标准曲线制作1 、取6 支1.5cmm1.5cm 试管,按下表加入2.0mg/mL 葡萄糖标准液和蒸馏水。管号 葡萄糖标 准液(mL )蒸馏 水(mL)葡萄糖含量(mg/mL)A5400 0 1 0 1 0.2 0.8 0.4 2 0.4 0.6 0.8 3 0.6 0.4 1.2 4 0.8 0.2 1.6 5 1 0 22 、在上述试管中分别加入DNS 试剂2.0mL ,于沸水浴中加热2min 进行 显色,取出后用流动水迅速冷却,各加入