精选优质文档-倾情为你奉上质粒DNA的提取一、实验方法碱裂解法抽提质粒DNA二、实验原理基于质粒DNA与染色体DNA变性与复性的差异。分子大小构型pH12.6pH4.8质粒DNA小环状变性不完全复性染色体DNA大环状完全变性不能复性三、实验步骤1）质粒提取1. 10,000g,1min离心收集1.55ml菌液沉淀于1.5ml离心管中。2. 加入100ml溶液1，振荡至彻底悬浮。3. 加入200ml溶液2，立即轻柔颠倒离心管6次，使菌体充分裂解，随后将离心管冰上放置3分钟4. 加入150ml溶液3，立即温和颠倒离心管数次，冰上放置3分钟，10，000g离心10min。5. 将步骤4的上清转移至新的离心管（尽量去除杂质），加入等体积的苯酚/氯仿/异戊醇混合均匀10，000g离心5min。6. 将步骤5的上清转移至新的离心管，加入2倍体积的无水乙醇，室温放置510min，沉降DNA7. 10，000g离心10分钟,弃乙醇，保留沉淀，加入1ml 70的乙醇洗涤沉
