1、实验 4： 细菌划线分离与纯培养12 3Fcous1.掌握需氧菌分离培养的基本要领。2 了解细菌 的分离培养原则及常用的方法一、实验目的1.融化培养基，倾注平板。2.用 普通琼脂平板每人做一次划线分离培养。（病料）3.用普通肉汤做一管大肠杆菌的移植培养。注 ：上述接种的培养基注明班组后进行培养 。二、实验内容三、作业1.为什么要进行细菌的分离培养？2.进行分离培养应注意哪些事项？3.细菌分离培养的方法有哪些？（重点叙述平板划线法 ）“”实验四实验四 小结在细菌学检验中，细菌的分离培养是重要的基本技术 之一。从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的方法称为分离。纯培养是指一株菌种或者一个培养物中所有的
2、细菌都是由一个细胞分裂、繁殖产生的后代。12 分离培养的目的在于从被检的材料中，或者从众多杂菌中分离出 纯的病原菌 。细菌分离培养应先从被检材料或者病料中分离培养出单个菌落 ，然后取 可疑菌落 进行 纯培养 ，再将纯培养物 移植培养 。“”实验四实验三 小结3 需氧性细菌分离培养法1、 平板划线分离法2、倾注平皿分离法3、芽孢需氧菌分离培养法4、利用化学药品的分离培养法5、实验动物分离法6、琼脂斜面分离法7、琼脂平板涂布分离法8、营养肉汤分离法“”实验四实验三 小结4 厌氧性细菌分离培养法1、生物学方法 植物组织（马铃薯、燕麦、发芽谷物）动物组织（新鲜动物组织、加热的肌肉）2、化学方法 焦性没
3、食子酸法、硫乙醇酸钠法3、物理学方法 利用加热、密封、抽气等物理方法，驱除或者隔绝环境及培养基中的氧气，造成厌氧环境。“”实验四实验三 小结5 兼 性厌氧性细菌分离培养法细菌培养中，有少数细菌（如牛型布氏杆菌）在含有 5%-10%二氧化碳的环境下才能生长。“”实验四实验三 小结6 平板划线分离培养法菌种被其他杂菌污染时或混合菌悬液常用平板划线法进行纯种分离。此 方法是借助将蘸有混合菌悬液的接种环在平板表面多方向连续划线，使混杂的微生物在平板表面分散，经培养得到分散的由单个微生物繁殖而成的菌落，从而达到纯化目的。“”实验四实验三 小结6 平板划线分离培养法1、划线分离的培养基必须事先倒好，需充分冷却待平板稍干后才可使用。2、为便于划线，一般培养基不宜太薄，每一个平皿倾倒约 20ml培养基，培养基应厚薄均匀，平板表面应光滑。3、划线分离主要有连续划线和分区划线两种。“”实验四实验三 小结6 平板划线分离培养法分区划线法：适用于含菌量较多的标本连续 划线法：适用于含菌量较少的标本穿刺 接种法 :用于观察细菌动力倾注培养法 :用于细菌 计数液体培养基接种 法斜面接种法 “”实验四实验三 小结7细菌接种的基本 程序灭菌接种环沾取标本接种灭菌接种环杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境
