第十二单元移植免疫学检测ppt课件.ppt

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资源描述

微量淋巴细胞毒试验(Microcytotoxicity assay)是在经典的补体依赖的淋巴细胞毒试验(complement dependent cytotoxicity,CDC)基础上发展而来的一项实验技术,目前已经广泛应用于器官移植供、受者间的交叉配型、复发性流产的封闭抗体检测等多个领域。在器官移植的文献中提及的CDC法多指微量淋巴细胞毒法。微量淋巴细胞毒试验概念v器械 微量淋巴细胞毒反应板(泰萨奇板)、倒置荧光显微镜、 微量移液器、吸管、温箱、离心机、磁架等 。v试剂 淋巴细胞分离液(Ficoll, 1.077)、T/B淋巴细胞分离磁珠及洗涤液、冻干补体、荧光染色液、供者全血23ml(EDTA或ACD抗凝)、受者血清2ml、阴性对照血清(可用1640培养液或PBS替代)、阳性对照血清(抗全淋 巴细胞抗体ALG/ATG)。实验器材和材料v 淋巴细胞的分离(Ficoll法): 1. 将供者全血用PBS(pH7.4)缓冲液 按1:1稀释,混匀备用; 2. 取15ml离心管一支,加入一定体积的Ficoll液,用吸取稀释后的供者全血,沿试管壁缓慢加入,使全血置于Ficoll上层。Fico

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