1、TLC薄 层层 析技 术Thin-Layer Chromatography 2一、一、 TLC简介简介二、操作过程二、操作过程三、三、 扩展及用途扩展及用途四、问题讨论四、问题讨论主要内容：主要内容：背景：薄层色谱法 (Thin-Layer Chromatography,简称 TLC）是 Kirchner等人在五十年代从经典柱色谱法及纸色谱法的基础上发展起来 的一 种 色 谱技术。六 十年代后， Stahl等人 对薄层色谱法的标准化、规格化及扩大应用等方面进行了许多工作，使该法日趋成熟。2010年版中国药典一部有 3341项鉴别采用 TLC法分类：按薄层色谱使用的固定相的性质及其分离机制可分为
2、吸附薄层、分配薄层、离子交换薄层及分子排阻薄层背景和分类4原理 : 利用吸附剂 (硅胶 )对样品中各 组 分 吸附能力 不同 ， 及展开剂对它们的 解吸附能力 的不同，使各 组 分达到分离 的目的 。特点 ： 微量、快速、简单、节省一般认为 TLC是一种 定性和半定量 的方法原理和特点5操作过程氧化铝 有弱碱性 pH=9、酸性 pH=4及中性 pH=7.5三种氧化铝。弱碱性氧化铝用来分离中性或碱性化合物；中性氧化铝适用于酸性及对碱不稳定的化合物的分离；酸性化合物可用酸性氧化铝分离。硅藻土、纤维素、葡聚糖凝胶等化学键合固定相 （ C18、 C8 等）薄层板硅胶 表面带硅醇基（ Si OH），呈弱
3、酸性 (pH=4.5)，活性硅胶适合分 离酸性或中性化合物，如酚类、有机酸、醛类、甾体化合物以及氨基酸类，是基于吸附作用；非活性硅胶含有一定的水，在分离色素时是基于分配作用 。硅胶 G: 是含有 13煅石膏（ gypsum）黏合剂的硅胶硅胶 H：不含黏合剂的硅胶硅胶 HF254：不含黏合剂，含有一种无机荧光剂（如锰激活的硅酸锌），在 254nm波长紫外光下呈强烈黄绿色荧光硅胶 GF254：含有煅石膏黏合剂，含荧光剂，在 254nm波长紫外光下呈强烈黄绿色荧光硅胶 HF254+366：不含粘合剂，在 254与 366nm波长有荧光硅胶 PF254：制备型的，在 254nm有荧光（有荧光剂，适用于
4、不发光不易显色物质的制备与分离） 市售预制板规格将 吸附剂 或 载体 均匀涂布在玻璃板、塑料片或铝箔上的预制板。薄层有 软板 及 硬板 两种。硬板系在吸附剂中加入适量粘合剂后用湿法涂层，粘合剂的加入可以增加薄层的强度。常用的粘合剂为 羧甲基纤维素钠 (CMCNa)或煅石膏 (CaSO41/2H2O)使用前一般应于 110 下活化 30min薄层厚度约为 0.2-0.3mm。 制备板 0.5-2mm。薄层的制备手动点样：灵活方便，常用于各种 TLC鉴别中。自动点样 重现性和 准确性好，常用于薄层扫描法的含量测定。半自动点样仪点样量：原点位置的负荷有限，体积 0.5 10微升，浓度通常为 0.5 2mg。直径 3mm以内样品溶剂：原则上应选择对可以溶解但溶解度不是很大的溶剂一定要有交叉点点样Spyringe10Note:a.点样的浓度要控制适当点样的浓度要控制适当；b.点的斑点较小，展开的点的斑点较小，展开的TLC 分离度好分离度好c. 0.3mm 毛细点有机相毛细点有机相， 0.5mm点水相。点水相。毛细管取样 1cm？3.14*（ 0.3mm/2） *10mm=1.413mm=0.71 L3.14*（ 0.5mm/2） *10mm=3.925mm=1.96 L
