1、常规的普通实验室检测在肉鸡养殖中的应用田 野 细菌的革兰氏染色 常用抗菌药物敏感性试验 金标层析法 检测技术 水的细菌学检查一、革兰氏染色1.革兰氏染色机理当用 结晶紫 初染后,所有细菌都被染成初染剂的蓝紫色。 碘 作为媒染剂,它能与结晶紫结合成 结晶紫一碘 的复合物,从而增强了染料与细菌的结合力。当用脱色剂处理时,两类细菌的脱色效果是不同的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成,壁厚、类脂质含量低,用 乙醇 (或丙酮 )脱色时细胞壁脱水、使肽聚糖层的网状结构孔径缩小,透性降低,从而使结晶紫-碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内,经脱色和复染后仍保留初染剂的 蓝紫色 。革兰氏阴性
2、菌则不同,由于其细胞壁肽聚糖层较薄、类脂含量高,所以当脱色处理时,类脂质被乙醇 (或丙酮 )溶解,细胞壁透性增大,使结晶紫 -碘的复合物比较容易被洗脱出来,用复染剂复染后,细胞被染上复染剂的 红色 。2.革兰氏染色法的基本方法先用初染剂 结晶紫 进行初染,再用 碘液媒染 ,然后用 乙醇 (或丙酮 )脱色 ,最后 用复染剂 (如番红 )复染 。经此方法染色后,细胞保留初染剂 蓝紫色 的细菌为革兰氏阳性菌;如果细胞中初染剂被脱色剂洗脱而使细菌染上 复染剂的颜色 (红色 ),该菌属于革兰氏阴性菌。3.革兰氏染色的步骤1)、涂片: 用 1%盐酸清洁玻片后,在玻片中央滴上一小滴蒸馏水,再用无菌操作的方法
3、挑菌少许于玻片的水中,并充分混匀涂成薄膜。2)、干燥: 将涂片置火焰高处微热烘干或自然干燥。3)、固定: 涂面朝上,通过微火 2-3次。 涂片 风干 固定 初染 水洗 媒染 水洗 脱色 水洗 复染 水洗 干燥 镜检菌悬液菌悬液 涂片涂片 干燥干燥滴加无滴加无菌水菌水固定固定取菌苔取菌苔涂片涂片4)、染色:结晶紫染色 1分钟 -水洗 -碘液媒染 1-2分钟 -水洗 -酒精脱色 15-20秒 -水洗 -番红复染色 2-3分钟-水洗 -干燥 -镜检记录。crystal violet stain wash with water 染色结果金黄色葡萄球菌和大肠杆菌混合菌样的革兰氏染色结果革 兰氏染色 结果 : 阴(性)红(色)阳(性)紫(色)染色结果金黄色葡萄球菌革兰氏染色结果