动物细胞冻存一、实验名称 动物细胞冻存二、实验目的 掌握动物细胞冻存的方法三、实验材料四、主要实验器材 1、长角镊子 2、超净工作台 3、细胞培养瓶 4、吸管 5、废液缸 6、二氧化碳培养箱 7、血球计数板 8、低速离心机 9、冰箱（ 4 ； -20 ； -80 ） 10、液氮罐五、实验步骤 原则：缓慢冷冻 主要操作步骤为：1 对 数生 长 期 的 细 胞 弃液， 0.25% 胰蛋白 酶 消 化 ；终止消化 。2加新鲜培养液，吹打制悬液。 离心 1000r/min， 10分 钟)。3 去上清液，加入含 20%小牛血清的完全培养基4 预 冷 15分 钟 后 （也可不用）4 加入已无菌的 DMSO或甘油 （含量 10），吹打混匀。细胞浓度为 310 6 110 7/mL之间。5加入 专 用冷 冻 塑料管中 1 1.5mL， 在火焰上封口，冷冻 管要将盖子盖 紧 ， 必要时可用胶布封口。 6 登 记 （日期、 细 胞种 类 及代次、 冻 存支数）。
