实用高效液相色谱法的建立纠错版-第8章-梯度洗脱(共28页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上第8章 梯度洗脱8-1引言如前所述,等度分离在洗脱全过程中流动相组成不变(例如50%甲醇-水),而在梯度洗脱中流动相组成随运行过程是变化的(例如5100%甲醇-水)。梯度洗脱中一般采用二元(溶剂)流动相:A与B,其中强溶剂B的浓度(%B)在运行过程中逐渐增加。图8-1所示为几种不同类型的梯度变化,其中线性梯度最为常用。除另有说明,本书中均假设为线性梯度。图8-1所示为流动相组成在20 min内,B浓度由0增大为100%(线性梯度,5%/min)。许多样品用梯度洗脱会分离更好,但许多实验室却对梯度洗脱的应用存在很大偏见。其原因有如下几点:1、有些实验室尚不具备梯度洗脱设备。2、梯度洗脱更复杂,似乎更难进行新方法建立与常规分析。3、某些HPLC检测器(如示差折光检测器)不能使用梯度洗脱。4、每次运行梯度洗脱后需重新平衡色谱柱,耗时较长。5、不同设备的分离结果可能不同,所以梯度洗脱法移植时会出现差异。6、梯度洗脱中的基线问题更为普遍,并且必须使用高纯溶剂。7、某些色谱柱流动相的联合应用不适于梯度洗脱。如

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