精选优质文档-倾情为你奉上第8章 梯度洗脱8-1引言如前所述，等度分离在洗脱全过程中流动相组成不变（例如50%甲醇-水），而在梯度洗脱中流动相组成随运行过程是变化的（例如5100%甲醇-水）。梯度洗脱中一般采用二元（溶剂）流动相：A与B，其中强溶剂B的浓度（%B）在运行过程中逐渐增加。图8-1所示为几种不同类型的梯度变化，其中线性梯度最为常用。除另有说明，本书中均假设为线性梯度。图8-1所示为流动相组成在20 min内，B浓度由0增大为100%（线性梯度，5%/min）。许多样品用梯度洗脱会分离更好，但许多实验室却对梯度洗脱的应用存在很大偏见。其原因有如下几点：1、有些实验室尚不具备梯度洗脱设备。2、梯度洗脱更复杂，似乎更难进行新方法建立与常规分析。3、某些HPLC检测器（如示差折光检测器）不能使用梯度洗脱。4、每次运行梯度洗脱后需重新平衡色谱柱，耗时较长。5、不同设备的分离结果可能不同，所以梯度洗脱法移植时会出现差异。6、梯度洗脱中的基线问题更为普遍，并且必须使用高纯溶剂。7、某些色谱柱流动相的联合应用不适于梯度洗脱。如
