酪氨酸酶活性抑制实验方法(共2页).doc

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精选优质文档-倾情为你奉上酪氨酸酶活性抑制实验方法一、试剂:酪氨酸酶、酪氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、阳性对照(熊果苷粉末)、样品、去离子水二、试剂配制:1、磷酸盐缓冲溶液(PH=6.8):先分别配制0.2M的磷酸二氢钠和0.2M的磷酸氢二钠。0.2M磷酸二氢钠:称取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml去离子水;0.2M磷酸氢二钠:称取31.2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml去离子水;取51ML磷酸二氢钠+49ML磷酸氢二钠即得0.2M、PH=6.8的磷酸缓冲液。2、L-酪氨酸溶液:称取L-酪氨酸25.6g,用磷酸缓冲液定容于50mL容量瓶中,即得L-酪氨酸溶液。3、酪氨酸酶溶液:将马铃薯洗净,于4预冷4h左右。去皮,切成约1.0 cm3丁状,于-20冷冻过夜。称重,按1:1( W:V )的比例加入4预冷的磷酸钠缓冲液,用组织捣碎机制成匀浆,3层纱布过滤,滤液于4000 r/min离心10min,上清液即为所得的酪氨酸酶粗酶液,4保存,2h内用完。4、受试液的配制:将原先所配5mg/

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