1、12006 级五年制本科分子生物学考试 B 卷1反式作用因子的结构域包括 、 、。2顺式作用元件包括 、 、 。3II 型限制酶切割产生的两种切口是 和 。4理想载体应有多克隆位点，供 ；必须有自身的复制子，才能 。5DNA 分子体外连接的方法有 、 、 和。6探针标记物分为 和 两种。7核酸杂交中，检测细胞或组织中的核酸要用 ；检测固定在膜上，未经分离的 DNA 分子要用 。8PCR 的每一轮循环均需经过 、 和 三步。9列出四种癌基因家族 、 、 和 。10mRNA 相对定量分析常用的方法为 和 。11基因治疗的主要策略有 、 和 三种。阅卷人 得分 二、单项选择题（每题 1 分，共 30
2、 分）1 2 3 4 5 6 7 8 9 10D C D B E D C D B C11 12 13 14 15 16 17 18 19 20大题 一 二 三 四 五总成绩复核人得分阅卷人 得分 一、填空题（每空 0.5 分，共 15 分）班级 专业 姓名 学号订装（试卷第 1 页共 7 页）2C E C E B C A C E A21 22 23 24 25 26 27 28 29 30B C B D E C E C C D1.关于基因的描述,错误的是:( )A.基因是含有编码 RNA 或肽链的信息单位B.基因结构中含有非编码序列C.真核结构基因是断裂基因 D.基因结构中不含有调控序列E.基
3、因片段可以是 DNA,也可以是 RNA2.启动子是( )A.mRNA 开始被翻译的序列 B.开始转录生成 mRNA 的 DNA 序列C.RNA 聚合酶识别和结合的 DNA 序列 D.阻遏蛋白结合 DNA 的部位E.产生阻遏物的基因3顺式作用元件不包括（ ）ATATA 盒 BCAAT 盒 CGC 盒 D沉默子 E以上都不是4真核基因的结构特点，错误的是（ ）A真核基因组结构庞大 B转录产物是多顺反子C含大量重复序列 D真核结构基因是断裂基因E90%左右的序列为非编码序列5基因表达过程不包括（ ）ADNA 甲基化 B转录 C翻译 DRNA 剪切 ERNA 复制6.分子克隆技术中，除下列何种酶外，均
4、为常用的工具酶（ ）A.逆转录酶 B.DNA 连接酶 C.末端转移酶 D.拓扑异构酶 E.限制性核酸内切酶7.COS 位点存在于( )A.pBR322 分子内 B.pUC 系列载体分子内 C. 噬菌体分子内 D.病毒载体分子内 E.YAC 分子内8.关于 SD 序列，错误的是（ ）A.存在于原核生物细胞内 B.是 1974 年 Shine 和 Dalgarno 发现的C.是位于 mRNA 中 AUG 上游约 311bP 的富含嘌呤的序列D.存在于真核细胞内 （试卷第 2 页共 7 页）3E.是 mRNA 与 30S 核糖体亚基之间的识别与结合序列9.对于 cDNA 文库,下列叙述中错误的是:A
5、.从 cDNA 文库中可筛选得到真核基因B.cDNA 文库是细胞总 mRNA 的克隆,其中各个克隆所含的外源 DNA 的片段是相同的C.cDNA 文库只包含表达蛋白质或多肽的基因D.特异性探针可从 cDNA 文库中得到E.cDNA 文库中某一克隆的扩增即是特异的 cDNA 克隆10抑癌基因可（ ）A促进细胞生长与增殖 B抑制细胞分化和成熟C促进细胞凋亡 D活化时可诱导肿瘤发生E正常组织中不表达11原癌基因活化的机制，错误的是（ ）A获得启动子或增强子 B基因易位C原癌基因的甲基化修饰 D原癌基因扩增E原癌基因点突变12Rb 基因，错误的是（ ）A是一种抑癌基因 B是视网膜母细胞瘤基因C表达产物
6、可促进细胞分化，抑制细胞增殖 D最初发现于视网膜母细胞瘤中E该基因活化可致视网膜母细胞瘤13P53 基因的作用错误的是（ ）A编码 P53 蛋白是一种核内磷酸化蛋白 B可识别细胞内 DNA 的损伤，并参与修复过程C可促进细胞生长、增殖、分化 D可促进 DNA 损伤的细胞凋亡E可抑制肿瘤发生14下列哪项不属于基因诊断的范畴（ ）A检测遗传病基因的结构 B检测病原体基因的结构C检测肿瘤相关基因 D检测基因表达水平E检测 DNA 的合成和分解状况15对基因诊断，下列概念中错误的是（ ）A.是病因诊断，有较强的针对性 B.只能检测处于活化状态的基因。C.灵敏度高，适用范围广 D.能检出潜伏期的，正在生
7、长的，难培养的病原体E.能够检测和分析肿瘤相关基因（试卷第 3 页共 7 页）416基因诊断的常用的分子生物学技术，错误的是（ ）APCR 技术 B核酸分子杂交技术C基因重组技术 D基因芯片 E基因测序17限制性片段长度多态性（RFLP ）用于基因诊断时，下列哪项是错误的（ ）A 可用于检测基因表达的异常B被检测的基因突变必须有酶切位点的改变C基因突变时，可致酶切片段的长度改变D基因突变时，可致酶切片段的数目改变E用于检测基因结构的异常18诊断已知点突变，最常用的方法是（ ）APCR-SSCP BPCR-RFLP CPCR-ASO DDNA 测序 E基因芯片19.Tm 即 DNA 的熔解温度，
8、下列叙述正确的是（ ）A双链 DNA 变性所需的的温度B通过 Tm 值可计算出 DNA 分子的 GC 对含量C在变性曲线中，Tm 是 A260 最大吸收值对应的温度D由 Tm 值可求出 DNA 分子中的复性所需的时间E由 Tm 值可推算出 DNA 分子的碱基排列顺序20.在确定 DNA 样品之间是否有同源性时，最常选用的杂交方法是（ ）A. dot blot B. 原位杂交 C. Northern blot D. Southern blot E. Westhern blot21.PCR 经若干循环后，其扩增产物序列是（ ）A.两种引物 3末端间的区域B.一引物的 5末端与另一引物的 3末端间的
9、区域C.两种引物 5末端间的区域D.产物一端是一引物的 5 末端，而 3末端不固定，长短不一E.产物的 3末端固定 5末端不同，长短不一22.PCR 的扩增倍数（1+X）n ，但当 n30 后，产物的量不再增加，这是因为（ ）A.模板已用完 B. dNTP 已用完 C.TaqDNA 聚合酶趋于饱和，出现“平台效应”D.缓冲离子已用完 E.产物对 PCR 反应的抑制作用23.关于 TaqDNA 聚合酶，下列叙述不正确的是（ ）A.能按引物 53方向，以 DNA 为模板，催化 dNTP 合成 DNA 链B.具有校读功能，即 35 核酸外切酶活性C.在 7075时，具有最高生物学活性（试卷第 4 页
10、共 7 页）5D.一般而言，在 PCR 反应体系中，TaqDNA 聚合酶用量过高，可导致非特异性产物增多E.通常是从嗜热水生菌中分离提取得到24.关于原核生物基因组结构的描述错误的是（ ）A只有一个 ori B具有操纵子结构C基因连续，无内含子 D无编码序列E基因组通常仅由一条环状 DNA 双链组成25下列哪一个不是 pBR322 的特点（ ）A是最早研究的质粒 B有两个遗传标记C为人工构建的质粒 D有多个克隆位点E无自身复制子26关于肿瘤的发生描述，错误的是（ ）A有些肿瘤可遗传 B肿瘤发生的实质为基因突变及表达的异常C肿瘤发生是抵抗力下降的结果 D原癌基因的激活和抑癌基因的失活是肿瘤发生的
11、重要原因E是细胞恶性增殖的结果27哪一种不是癌基因的表达产物（ ）A生长因子 B蛋白激酶 C转录因子 D低分子量蛋白 E融合蛋白28.关于基因表达,正确的是( )A.基因表达的产物只能是蛋白质 B.生物体内只有少数基因不表达C.基因表达通常指基因的转录及翻译过程 D.不同组织基因表达活性相同 E.以上都不对29.关于组成性基因表达,错误的是( )A.组成性表达的基因通常称为管家基因 B.是某些能持续表达的基因C.无时间特异性 D.是一组基因的协同表达E.表达产物往往是生命过程必不可少的30分子克隆技术中，除下列何种酶外，均为常用的工具酶（ ）A逆转录酶 BDNA 连接酶 C末端转移酶 D拓扑异
12、构酶E限制性核酸内切酶阅卷人 得分 三、名词解释（每题 4 分，共 24 分）1原癌基因：促进细胞正常生长和增殖，抑制细胞分化和成熟的一类基（试卷第 5 页共 7 页）6因，具有潜在的致癌性，当其表达失控时，可能导致细胞癌变，正常时不表达或低表达。2SSCP：即单链构象多态性分析，指等长的单链 DNA 片段之间，由于碱基排列顺序不同，可形成不同的空间构象，电泳时的迁移率不同，由此可用于筛查基因突变。3Klenow 片段：Klenow 片段是由 Coli DNA pol经枯草杆菌处理后得到的大片段，具有 53聚合酶的活性，具有 35外切酶的活性。4感受态细胞 ：用适当的理化方法处理受体菌后，使宿
13、主细胞处于最适摄取和容忍重组体的状态，此时的宿主细胞即称感受态细胞。5. RT-PCR ：即逆转录 PCR（reverse transcription PCR） ，又称RNAPCR，是以 mRNA 为模板，经逆转录和体外扩增放大得到大量 cDNA 的一种 PCR 技术。6反式作用因子与其它基因的順式作用元件结合，调节基因转录活性的蛋白质因子，根据功能不同可分为基本转录因子和特异性转录因子。阅卷人 得分 四、简答题（每题 7 分，共 21 分）1.简述基因工程的过程。（试卷第 6 页共 7 页）7（1）目的基因的获取（2）基因载体的选择与构建（3）目的基因与载体的体外拼接（4）重组 DNA 分子
14、导入受体细胞（5）筛选并无性繁殖含有重组分子的受体细胞（转化子） ， （6）检测出表达产物。2.简述操纵子的组成及乳糖操纵子的负调控机制。(1)乳糖操纵子的结构中含 Z、Y、A 三个结构基因，分别编码利用乳糖的-半乳糖苷酶、通透酶、乙酰基转移酶。此外还有一个操纵序列 O、一个启动序列 P 及上游的分解代谢物基因激活蛋白（CAP）结合位点，构成乳糖操纵子的调控区。在操纵子的上游还有一个调节基因 i，编码一种阻遏蛋白，后者可与 O 序列结合而使操纵子处于关闭状态。（2）乳糖操纵子的负调控：当细菌以葡萄糖为能源时，i 基因编码一种阻遏蛋白，与 O 序列结合，阻碍 RNA 聚合酶与 P 序列结合和向结
15、构基因移动，而抑制结构基因的转录。（3）乳糖操纵子的正调控：当细菌只能以乳糖为能源时，乳糖转变为半乳糖，后者与阻遏蛋白结合，使其构象变化而不能结合 O 序列，从而诱导转录过程。同时，细胞内 cAMP 的含量升高，cAMP 与 CAP 结合，使 CAP结合到 CAP 位点上，促进转录过程。3.简述 PCR 的基本原理及特点。基本原理：体细胞分裂中 DNA 的半保留复制机理。体外 DNA 分子的热变性和退火。dNTP 存在时，耐高温的 TaqDNA 聚合酶使引物沿单链模板延伸成为 dsDNA。故通过高温变性、低温退火、适温延伸的若干循环，目的 DNA 被扩增、放大。 特点：高效性，高度特异性，高度
16、灵敏性， （4）可适用样品的广泛性。阅卷人 得分 五、论述题（共 10 分）8列举出克隆基因筛选和鉴定的五种方法？（要求：方法选择和简要原理） 1.抗药性标志选择：利用遗传标记，在药物培养基上培养，筛选出阳性菌株；2.分子杂交法：根据目的基因设计探针，可进行杂交检测；3.PCR 检测：根据目的基因设计引物，可根据有无扩增产物进行检测；（4）.限制酶切检测：根据目的基因选择.限制酶，对酶切图谱分析进行检测；（5）.免役学检测：根据目的基因表达产物设计.抗体进行检测。（试卷第 7 页共 7 页）9参考答案：1. DNA 结合域，转录活化域，二聚化结构域。2启动子，增强子，沉默子。3.粘性末端，平头末端。4.供外源基因插入，自主复制。6.同位素标记，非同位素标记。7.原位杂交，斑点杂交。8.变性，退火，延伸。9.src,myb,sis,ras 等。10. 基因置换、基因增补、基因矫正、基因失活
