1、 第 1 页 共 3页 白 芍 中 芍 药 甙 的 含 量 测 定 原 理 “白芍”为中国药典 1995 年版一部收载品种。白芍的主要化学成分为单萜及其甙：芍药甙（ paeoniflorin） 3.35.7%，并含少量羟基芍药甙，苯甲酰芍药甙等 1。中国药典该品种 鉴别 项下，用薄层色谱法鉴别其含有的芍药甙，本文用薄层扫描法测定白芍中芍药甙的含量。 样品、 试剂及仪器 样品： 香港市场商品 对照品： 芍药甙（ paeoniflorin） 中国药品生物制品检定所提供 试剂： 硅胶 G（ 60 型）（青岛海洋化工集团公司出品 国家药典会监制， 批号： 95 14） 乙醇，氯仿，醋酸乙酯，甲醇，甲酸
2、，硫酸，香兰素等（均为分析纯） 仪器： 手动薄层涂布器（ DESAGA） CAMAG 点样器 Nanomat III CAMAG 双槽展开箱 CAMAG 薄层扫描仪（ SCANNER 3） CAMAG 薄层色谱摄像仪（ REPROSTAR II） 供试液制备 取本品粉末约 2g，精密称定，置回流瓶中，加入乙醇于水浴上回流三次，每次40ml， 1 小时，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣用甲醇溶解并移入 2ml 容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 第 2 页 共 3页 白 芍 中 芍 药 甙 的 含 量 测 定 对照品溶液制备 取芍药甙对照品，加甲醇制成每 1ml含 3mg 的溶液，作为对照
3、品溶液。 色谱条件 薄层板： 硅胶 G 薄层板（ 20 10cm） 硅胶 G60F254 预制板（ Merck）（ 20 10cm） 点样： 用 CAMAG 点样器 Nanomat III 点状点样 展开； 以氯仿 -醋酸乙酯 -甲醇 -甲酸（ 40： 5： 10： 0.2）为展开剂，展开约 8cm，取出，晾干。 显色： 喷以显色剂 （ 1）取水 25ml，缓慢加硫酸 50ml，放冷后，再加乙醇 25ml，摇匀；（ 2） 8%香草醛无水乙醇溶液；用时将（ 1）（ 2）两溶液混合按5： 1，冰箱中保存 后，在 80oC加热 710 分钟，至斑点显色清晰。 测 定 光源： 钨灯 扫描用计算机软件：
4、 CAMAG CATS 4.04 扫描方式 : 反射法吸收扫描，波长： s=580nm。 扫描速度： 20mm/秒 扫描时间： 10 分钟（ 18 个扫描道，优化扫描） 积分时间： 手铺板：屏幕积分 16 分钟 预制板： 屏幕积分 16 分钟 计算： 直线回归 测 定 结 果 手铺板 : 预制板 : 样品取样量（ g） 样品点样量（ l） 测定值（ g） cv值（ %） n 含量（ %） 1# 2.0160 2 4.682 2.5 6 0.232 2# 1.9948 2 4.644 2.8 6 0.233 样品取样量（ g） 样品点样量（ l） 测定值（ g） cv值（ %） n 含量（ %）
5、 1# 2.0160 2 4.573 2.2 6 0.227 2# 1.9948 2 4.502 1.8 6 0.226 第 3 页 共 3页 白 芍 中 芍 药 甙 的 含 量 测 定 讨 论 本试验的关键在于显色和相对湿度的控制。显色剂宜新鲜配制，喷雾要均匀，显色温度和时间注意控制；显色后应马上扫描，否则芍药甙斑点会逐渐退色。CAMAG 公司的新型扫描仪（ SCANNER 3），具有快速测定的优点（ 18 个扫描道 23 分钟测定完毕），减少了因测定时间过长而造成的测定误差。相对湿度较大时，样品色谱图分离度较好，湿度应控制在 88%。 2 预制板较手铺板的斑点集中、整齐，扫描基线平稳，因而，两份测定结果较接近。 参考文献 ： 1 生药学徐国钧主编 人民卫生出版社 第 181 页码 2 中华人民共和国中药薄层色谱彩色图集谢培山主编 广东科技出版社 第 39 页 广州市药物检测研究所 试验责任人：谢培山 试验者：黄劲梅
