1、 1 莲雾 种质资源 分类 研究进展 1 杨光华，杨小锋 2， 李劲松， 杨沐，黄植，曹明 (海南省三亚市南繁科学技术研究院 / 海南省热带设施农业工程技术研究中心 海南 三亚 572000) 摘要： 本文综述了莲雾 种质 资源分类的研究进展，指出了莲雾品种分类中存在的一些问题，并提出了今后的研究方向， 为建立更加科学合理的莲雾品种分析系统以及合理利用莲雾 种质资源 提供理论参考。 关键词： 莲雾 ； 种质资源 ； 分类 Advances in Research on Germplasm Resources Classification of Syzygium samarangense Mer
2、r. et Perry YANG Guang-hua， YANG Xiao-feng， LI Jing-song， YANG Mu， HUANG Zhi， Cao Ming （ Sanya Sci-Tech Academy for Crop Winter Multiplication； Hainan Engineering Research Center for Tropical Facility Agriculture， Hainan， Sanya 572000， China） Abstract: In this paper, the research advances on the ger
3、mplasm resources classification of Syzygium samarangense Merr. et Perry are reviewed, some problems with the general condition on the classification are pointed out, and proposed the next research direction, which can provide a theoretical reference to establish a more scientific and rational classi
4、fication system and rational use of Syzygium samarangense germplasm resources. Key words: Syzygium samarangense Merr. et Perry； Germplasm resource； Classification 莲雾 （ Syzygium samarangense Merr. et Perry） 又称洋蒲桃、 金山蒲桃、 水蒲桃、 甜雾、棉花果等，是桃金娘科蒲桃属热带 亚热带 果树 。 莲雾用途广泛，其生长速度快，周年常绿，树姿优美， 花期长，果形奇特， 且不同品种的莲雾多彩多姿，
5、 具有较好的观赏价值 和经济价值 1。 莲雾在长期的引种和栽培过程中已选育了许多的优良品种和品系，同物异名和同名异物现象十分严重 2，品种间的亲缘关系不明了，严重影响了莲雾优良品种的推广、育种亲本的选配和栽培适地的选择。植物种质资源研究是人们开展 品种选育工作的根本物质基础，在作物育种发展过程中，起着至关重要的作用 。由于 莲雾 与其他大多数作物相比，具有个体大、形状明显、色泽鲜艳与丰富、肉质质地差别明显、香气不同等特点 ，所以 对 莲雾 的 品种 分类应当 更为 严格 。 同时，莲雾 种质资源不仅包括栽培品种，也包括半栽培品种和野生果树的种、变种。 为 此笔者 从多方面 对莲雾 种质 进行了
6、 详细的综述，以期为莲雾的品种识别和 种质资源的 鉴定提供参考， 同时 规范品种市场，有利于 莲雾 种质 资源的搜集、分类、保存以及 优良 品种的选育和推广。 1 莲雾生物学特性 莲雾成年树高 3 m 左右，具有一年多次开花 、结果的习性， 老熟枝梢的顶芽或其下的腋收稿时间 20 X X-X-X 基金项目 海南省工程技术研究中心专项项目 “ 莲雾设施栽培关键生产技术研究 ”资助 作者简介 杨光华，男，研究实习员，硕士，专业方向：设施园艺， E-mail: *通讯作者 （ Corresponding author）： 杨小锋 ， 副 研究员， 专业方向：设施园艺与无土栽培技术研究， E-mail
7、: 2 芽分化为花芽，每 个 花穗有小花数朵。 在东南亚地区 3-5 月份开 1 次花 ， 5-6 月果实成熟 ， 7月下旬开 第 2 次花 ， 8-9 月果实成熟 ， 12 月份还有开花结果。 莲雾喜温怕寒，最适生长温度在 25-30 。叶片较大，多为单叶对生，呈椭圆形，叶表面深绿色。大多数品种每年一般都可抽发新梢 4-5 次 ，低温干旱时停止新梢萌发。果实呈钟形，一般为 50-80 g， 一些大果品系果实超过 100 g， 果色鲜艳，果肉海绵质，略有苹果香气，味道清甜，清凉爽口 3。 唐为萍 等用冷冻切片法研究莲雾叶的解剖结构 ，通过显微镜观察，表现出其喜高温喜湿 润 生活习性的一些特征
8、4。 2 莲雾种质资源概况 莲雾 原产于马来半岛、印度尼西亚及安达曼、 Nicobar 群岛一带，被世界热带地区广泛引种。目前国外 栽培最多 的是 印度尼西亚爪哇岛， 在 其他东南亚国家 也 均有栽培。 17 世纪时，莲雾由荷兰人从爪哇引入台湾，经过近几十年管理技术的改革，已经晋升为台湾最重要的经济果树之一，也成 为该省的四大水果之一 5。之后在我国广东、海南、福建、广西、云南 和四川等省（区）有少量栽培。 台湾于 1970 年选出了黑珍珠（粉红色种）品种 ，并在栽培管理和产期调节上获得突破性进展之 后， 莲雾 才 真正成为 了栽培品种 。 台湾莲雾的品种 众多， 其选育过程 经历了从商品化栽
9、培品种到优势品种，最后到适应性强 、容易栽培的品种的不同阶段，黑珍珠，黑金刚和黑钻石，德男泰国种分别为三个阶段的代表品种， 另外一些常见栽培品种有泰国红 钻 石、印泰莲雾（印度红）等。 2006 年在广西桂平市西山镇白兰村发现了 两 棵野生莲雾，为开发和利用莲雾的种质资源 ， 连续多年对其特征特性等进行了观察研究，并进行人工繁殖栽培 6。 目前，对莲雾种质资源的收集与研究较多的单位有台湾屏东科技大学 和 中国热带农业科学院南亚热带作物研究所 ， 台湾屏东科技大学收集 的 品种和种质资源约有 30 多种 ， 南亚热带作物研究所 收集了大约 14 种。 谢江辉等 已经对 莲雾种质资源 进行了 收集
10、、鉴定和评价工作， 同时 研究其产期调控相关栽培技术，并且 建立了莲雾种植资源圃 7。 3 莲雾品种分类研究 3.1 形态学分类 生物在长期的自然进化过程中形成了本物种固有的特性，其中生物的形态特征是人们识别生物种类，对众多的 生物进行科学分类的主要依据。果树的形态学分类 是根据 其 叶、 枝、花、果以及根的植物学形态特征差异进行 的 分类研究。该法操作简便易行，具有最长的研究历史。 莲雾品种多以果色来命名， 刘铭峰根据果实色泽将莲雾 分 为 下列 五 种 3,8：（ 1）大（深）红色小果品种：果形小，近果柄端稍长，果色好，耐储存 ， 稍有涩味，为 本地种，是台湾栽培 最早的品种 ； （ 2）
11、粉红色品种： 称 南洋莲雾，其果形大，早熟品种，果色和果 形都很好看，甜度、口感都佳，产量较高，是目前台湾栽培的主要品种 ， 常见的几个粉红色改良品种有黑珍珠、黑金刚、黑钻石等 ； （ 3）白色品 种： 果皮乳白色， 果形小，近果柄一端稍长，品质优，但因果形小，产量低，为晚熟品种；（ 4）绿色品种： 果皮翠绿色，为 台湾培育的新型品种 ，俗称 20 世纪莲雾，甜味最高，并且具有独特的香味 ；（ 5）大果品系：从粉红种变异的品系中筛选出来 的， 其叶片较大，枝条与主干的角度较大， 较柔软，单果中 100-300 克，果脊明显，开花时花穗数较南洋种多，果皮着色较红。 常见的改良大果品种有 泰国红钻
12、石、红宝石和 印度红等 。 果树 品种鉴定是 依据所研究树种 的 最 显著 的 形态特征进行区分、分类和命名 的研究过程 ， 但是 因为植物的 形态性状 因 环境条件和栽培技术 的不同 而发生 不同程度的 变化 ，具有不稳定性 ， 并 且 果树 品种水平上的形态 差异 有时 不是很明显 ， 难以 进行品种鉴定 。依据 果实特征 差异 的 品种 鉴定要等到 果树结果之 后 ， 周期较 长 ， 所以形态学标记已 经难以满足 对3 越来越多自然选育和人工培育的果树品种进行鉴定的要求 9。 3.2 蛋白质标记分类 蛋白质作为生物大分子， 其与形态形状、细 胞学特征相比，数量丰富，受环境影响小，能够更好
13、的反映遗传多样性 。 酶作为遗传标记是在 1959 年 Markert 和 Moiler 提出同工酶后迅速发展起来的，直到 20 世纪 70 年代酶电泳技术才开始应用于植物研究 10。 同工酶酶谱可以用来反映物种亲缘关系的远近 ， 该 分析技术在生物 科学领域 已 经 得到 了 广泛 的 应用，在品种分类 和 鉴定 、亲缘关系 的远近、生物个体的遗传变异 等 方面发挥着 重要作用。 在莲雾的 种质资源 分类研究上，王家保等 利用同工酶技术从 蛋白质 标记上 进行 莲雾品种 的 鉴别 ， 他们 认为莲雾 的 品种在酶谱上表现的差异并不与它们在形态上的差异一致。 他们对 11 份莲雾资源叶片的过氧
14、化物酶、酯酶和淀粉酶同工酶进行聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 ，然后 计算出了品种间的 遗传相似指数和 遗传距离， 发现各个种在不同个体间存在丰富的遗传差异，通过 聚类分析表明： 除 2 份青莲雾外，供试莲雾资源可按不同品种名称一一加以区分 。特别是白皮莲雾具有独特的带型，易于和其它品种区分。 聚类分析显示， 2 份青莲雾的酶谱存在较大差异，二者遗传距离达 0.3143，显然是同名异物 。 红皮 莲雾 的各类资源间的亲缘关系较近，其次是红 皮莲雾和白皮莲雾，而青皮莲雾与红皮莲雾和白 皮 莲雾 的 各类资源亲缘关系 较远 。并且他们推断，白皮莲雾可能是青皮莲雾和红皮莲雾之间的一个过渡类型 11。 3.3
15、 DNA 分子标记分类 DNA 分子 标记 是以生物个体间基因组中碱基序列差异为基础的遗传标记， 能够 最 直接地 反映 物种在 DNA 水 平 上的 遗传多样性 ，也 可以 用于 种质资源的分类。 因为 DNA分子标记 是 从遗传物质 DNA 水平上 进行物种 遗传变异规律 的研究 ， 所以它能 能够排除环境条件的影响，从而使 其 结果 有 更加 好的稳定性和 可靠 性 。 DNA 分子标记的发展也为果树的分类提供了更为重要的研究技术。 从植物组织中提取 DNA 是进行分子生物学方面研究的必要前提。 赵志常等人针对莲雾组织细胞中含有大量影响 DNA 提取质量的多糖、多酚等次生代谢物质的特点，
16、在常规 DNA提取方法的基础上做了技术改良，即加入 PVP 和 -巯基乙醇防 止 褐变，成功地从叶片中提取 了 较高质量的基因组 DNA。用 4 个随机引物扩增出了较好的条带，进一步说明该 DNA提取方法提取的 DNA 纯度较高，可用于 RAPD 分析 12。 何桥等以黑珍珠莲雾 叶片 为试材，对 PCR 反应体系中各个反应条件进行优化， 建立 了适合于莲雾 ISSR 分析 的 最佳 反应体系13。 利用此优化体系对 12 个连雾 种 和 2 个 莲雾 近缘种进行了 ISSR 扩增 分析， 结果显示 18条引物共扩增出 459 个位点，其中 包含 多态性位点 435 个 (94.77%)， I
17、SSR 扩增条带丰富，多态性条带检出率高 。聚类分析 表明 ： 莲雾 、 蒲桃 与 马六甲蒲桃 各自为一大类 ； 并且 莲雾 的12 个 品种 又可以 分成 四 类 ，这与传统分类学上按照果实成熟期的 分类 结果 相吻合 ， 因此 成熟期可能在莲雾亲缘关系和分类地位中有重要作用 ，但同一类的莲雾资源 的 果皮 颜色存在差异，所以果皮颜色与个类型间的亲缘关系并没有相关性 7。 蔡元保等人以莲雾 DNA 为模板，应用正交设计法对 PCR 反应体系进行了优化 ， 建立 了 最佳的 20 l 反应体系 ， 利用该优化体系进行 SRAP-PCR 扩增， 结果表明其 具有 较好的 稳定 性和 重复性 ，
18、为 莲雾种质 资源的 鉴定 和分类 、遗传多样性 研究提供了理论 基础 14。 4 展望 4.1 种质资源普查 、收集， 统一品种分类方法 目前 关于 莲雾 的研 究主要在引种和产期条件上，部分对于 树种 的研究 ，也主要 集中于栽培品种，而对 于各地原种的分布 了解 甚少 。由于台湾、海南、广东、广西、云南等地之间存在着各种地理条件上的隔阻，使得莲雾品种 同物异名和 同名异物现象 普遍存在， 这就使得莲雾品种分类鉴定尤为重要 。 目前有些单位已经在做 莲雾种质资源的调查和分类保存 方面的4 工作，如中国热带农业科学院南亚热带作物研究所已经建立起了莲雾种质圃。 目前大多数研究者都是孤立地进行单
19、一 品种 的研究 ，缺乏各地 各类 品种 资源 之间的 评比筛选，致使各地不同品种的优劣性无法得到可靠信息 。所以， 在莲雾品种 资源 的 调查和收集 时 ，需要按 新版国际栽培植物命名法规进行正确 的命名，并且 结合细胞学、蛋白质 水平和 DNA 分子水平 等多个水平上 进行品种鉴定和品种分类， 从而建立 科学 合理的品种分类系统 ， 推动莲雾相关科研的进一步发展。 4.2 加强品种特性研究，培育新型 品种 加强 莲雾 各品种生态学习性、生物学习性及栽培技术的研究，并且 研究材料不应仅 为 栽培 品种 ，应 当 加大对野生种及近缘种的研究比例 ， 为 培育 优良品种提供理论 基础 与技术支撑
20、 。尽快选育出适合当地种植的品种，同时发展莲雾种苗快繁技术，促进 莲雾产业的发展。 参考文献 1 农业部南亚办 . 中国热带南亚热带果树 M. 北京：中国农业出版社， 1988， 285-288. 2 张育英，陈三阳 . 热带亚热带果树分类学 M. 上海：上海科学技术出版社， 1992， 173-177. 3 李正翔，郭泽成，陈童 . 莲雾栽培技术 M. 海南：海南出版社 ， 2009， 1-6. 4 唐为萍 ， 陈树思 ， 朱慧 等 . 莲雾叶片的解剖学研究 J. 韩山师范学院学报 ， 2008， 6: 62-66. 5 杨荣萍 ， 陈贤 ， 张宏 等 . 莲雾研究进展 J. 中国果菜 ，
21、2009， 1: 41-43. 6 曾仕伟，黎礼海，谢创平 . 桂平野 生莲雾的特性考察及人工栽培 J. 广西热带农业， 2010，5: 56-57. 7 何桥，梁国鲁，谢江辉 等 . 莲雾种质资源遗传多样性的 ISSR 分析 J. 园艺学报 ， 2006，33(2):392-394. 8 刘铭峰 . 莲雾 J. 台南区农业改良场特刊第 3 号， 1991， 5. 9 王国荣，吴府胜 . 果树种质资源研究及孢粉学应用研究进展 J. 山东林业科技 ， 2007，171(4): 84-86. 10 明军，张启翔，张义 等 . 园林及园艺植物品种鉴定常规技术研究进展 J. 世界林业研究 ， 2002， 15(6): 14-20. 11 王家保，姜成东，李金成 等 . 11 份莲雾资源的同工酶评价 J. 热带作物学报 ， 2004，25(2):15-19. 12 赵志常，陈业渊，刘运春 . 莲雾 DNA 的提取 J. 亚热带农业研究 ， 2005， 1(3): 11-12. 13 何桥，梁国鲁，谢江辉 . 莲雾 ISSR 反应体系的优化与应用 J. 果树学报 ， 2005，22(2):186-189. 14 蔡元保，杨祥燕，黄明忠 等 . 莲雾 SRAP 反应体现的优化及其应用 J. 中国农学通报 ，2011， 27(22):214-218.
