1、免疫标记的应用与评价上海交通大学瑞金临床医学院免疫标记的应用n 干细胞的确定 CD34/CD38/CD90HPC/PBSC定量分析1.移植治疗的日益普及2.移植门槛的降低3.干细胞采集的确定4.有效干细胞的确定要求 (CD34、 CD90、CD38等 )CD34+的分析:未动员前外周血中 CD34+细胞 1 4%,CD34+/CD38-细胞 1/2500, CD34+/CD38-/CD90+细胞 1/10000。各家单抗不同、操作不一,结果难以比较。内毒素、单纯化疗(骨髓抑制)、细胞因子、化疗联合细胞因子 等的动员。n 淋巴细胞和 NK细胞确定和定量分析n 淋巴细胞分化增殖异常的信号n 淋巴细
2、胞与髓系细胞的鉴别n 混合性白血病和未确定性 (型 )白血病的诊断n 造血干细胞病变的信号n 疾病的预后判断T细胞标记T细胞及其亚群 T祖细胞( pro-T) 的表型为 CD34+、 TdT+、 CD10+、 CD7+、 未成熟 T细胞标志 CD3、 CD4和 CD8。 在 T细胞发育过程中, CD7是最早出现的 T细胞标志,且贯穿表达在整个 T细胞分化发育过程中。胸腺细胞要分化发育为有功能的成熟 T细胞,细胞表面标志需经历一定的变化过程。从 CD7+、 CD2-、 CD3-、 CD4-、 CD8-、 TCR-CD7 +、 CD2+、 CD3+、 CD4-、 CD8-、 TCR-( 即 CD4
3、、 CD8双阴性) CD7+、 CD1+、CD2+、 CD3+、 CD4+、 CD8+、 TCR+( 即 CD4、CD8双阳性),最后发育成 CD7+、 CD2+、CD3+、 CD4+、 CD8-、 TCR+和 CD7+、 CD2+、CD3+、 CD4-、 CD8+、 TCR+单阳性的两群成熟胸腺细胞,然后进入外周淋巴器官和血液,执行免疫功能。但在正常外周血中通常存在 CD3+、 CD4+、CD8-( TH/TI), CD3+、 CD4-、 CD8+( TS/TC), CD3+ CD4+ CD8+和 CD3+ CD4- CD8-四种表型不同的 T细胞,它们分别占 T细胞总数的 60%70%,
4、20%30%, 1%3%,1%10%。前三种表型细胞的 TCR主要为TCR , 而 CD4- CD8- T细胞主要表达TCR , 他们都执行细胞免疫功能。n CD2是绵羊红细胞受体和淋巴细胞功能相关抗原 -2( LFA-2), 表达于人 95%T细胞、 50% 70胸腺细胞和大颗粒淋巴细胞(LGL NK) 的表面。 CD3是 T细胞表面抗原,表达于成熟胸腺细胞、静息和激活的的外周血 T细胞,是鉴定 T细胞的重要标志,其胞浆和膜 CD3是早期和普通型 T细胞白血病的主要分型标记。 n CD5、 CD7是 T细胞白血病较特异的标记,也是髓系白血病时最常见的伴随标记。CD15、 CD45则是白细胞的
5、共同标记抗体,在淋巴瘤的诊断中有一定的价值。而 CD25和 CD28主要分布于活化 T淋巴细胞表面,为活化 T淋巴细胞标志。胸腺细胞、静止 T细胞、静止 B细胞以及 NK细胞表面无表达。主要用于淋巴细胞疾病的免疫分型。外周血淋巴细胞 CD25+、 CD28+占 54% 86% n 末端脱氧核苷酸转移酶( TdT) 和 II类人类白细胞抗原( HLA-DR) 的阳性表达对早期 T细胞白血病的诊断有重要价值。TCR、 、 的基因重排检测有利于恶性 T细胞疾病细胞异常克隆存在的确定。n 另外, 80 90和 95以上的 NK细胞表达 CD16和 CD56。 用 CD3-CD16+CD56+可定义 NK细胞。