1、第八节 基因工程药物的分离纯化基因工程药物的分离、纯化非常重要。表达的产物都是多肽或蛋白质 。它的制得具有以下特点： 表达产物在初始料中含量较低； 含有大量细胞及代谢产物； 表达产物稳定性差，易失活变性； 表达产物的种类繁多、结构不一、活性各异； 对其质量要求纯度高、无菌、无热原。一、建立分离纯化工艺的根据 含目的产物的起始料的特点基因工程菌的发酵产物其上游过程的各种因素对分离、纯化工艺有影响。包括： 菌种的类型及其代谢特性。 原材料培养基的来源及其质量。 生产工艺及条件。 物料中杂质的种类和性质。 目的产物特性。 产品质量的要求二 、分离纯化的基本过程发酵液细胞分离胞内产物 胞外产物细胞破碎
2、固液分离 浓缩 初步分离 高度纯化 制剂 产品包含体 细胞碎片分离变性复性三、分离纯化的技术分离纯化的技术要求： 技术条件温和能保持产物生物活性。 选择性好，能从复杂的混合物中有效的将目的产物分离，达到较高的纯化倍数。 收率要高。 两个技数间能直接衔接，不需要对物料加以处理。 纯化过程要快，满足高生产率的要求。 细胞破碎与固液分离 细胞收集： 离心法、膜分离法。 细胞破碎：机械破碎法、非机械破碎法。 固液分离 目的产物的分离纯化目的产物含有大量杂质必须进行分离纯化。蛋白质分离纯化方法的设计根据其分子的理化性质和生物学特性来决定。产 物 特 性 作 用等电点 决定离子交换种类及条件相对分子量 选择不同孔径的介质疏水性 与疏水、反相介质结合的程度生物特异性 决定亲和配基溶解性 决定分离体系及蛋白浓度稳定性 决定工艺采用温度及流程时间 目的产物的分离纯化目的产物含有大量杂质必须进行分离纯化。蛋白质分离纯化方法的设计根据其分子的理化性质和生物学特性来决定。
