精选优质文档-倾情为你奉上包涵体蛋白的纯化和复性1菌体的收集和破碎用50 ml离心管分别收集诱导表达后的培养物，8000 rpm 4离心10 min。沉淀用适量的超声破菌缓冲液重悬。【备注】超声破菌缓冲液（20 mmol/L Tris-HCl pH8.0、0.5 mol/L NaCl、1 mmol/L EDTA、1 mg/mL溶菌酶）重悬后的菌液于冰浴中进行超声波破碎，其条件为：功率为300W，占空比50%，每个循环30 s，总时间20 min。破碎后的匀浆， 4、 12000 rpm离心15 min。分别取上清液和沉淀进行12% SDS-PAGE分析，确定目的蛋白是否以包涵体的形式表达。2包涵体的处理洗涤：沉淀用适量的包涵体洗涤缓冲液重悬后，搅拌洗涤2030 min，于4，12000 rpm离心15 min，弃去上清液。重复一次。再用适量的50 mmol/L Tris pH8.0溶液洗涤一遍（以去除残留的EDTA），于4 12000 rpm离心15 min，弃去上清液。【备注】包涵体洗涤缓冲液（20 mmol/L TrisHCl
